天然抗体3B4在抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染中的作用及其机制研究

Meticillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is a common multidrug-resistant bacteria, and it is a leading cause of death for many severe cases. The term resistance in the context of antibiotics is generally clear, at the same time researcher fixed more eyes on body's own anti-infective effects. The previous study showed that natural antibodies play an important role in the body's resistance to infection, however, the effect and mechanism of its anti-MRSA is not clear.. In our previous work, a natural antibody 3B4 was obtianed. 3B4 could be combined with staphylococcus aureus, and a protective effect for MRSA was found in 3B4 transgenic mice. Based on the above findings, we will observe the influence of 3b4 on the growth of MRSA and opsonophagocytic activity in vitro. We will observe the role and explore the mechnism of 3B4 in the treatment of skin and systemic MRSA infections in vivo meanwhile. This study will help to further elucidate the role of natural antibodies in the MRSA infection, and provide useful ideas for prevention and treatment of MRSA infection.

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是临床上常见的多重耐药菌，是许多重症患者死亡的直接原因。抗生素难以控制细菌感染的背景下，机体自身抗感染机制益发受到关注。研究表明天然IgM型抗体在机体抗感染中发挥重要的作用，然而其抗MRSA的作用及机制尚不明确。.本研究组在前期工作中获得了天然IgM型抗体3B4，发现该抗体可以结合金黄色葡萄球菌，3B4转基因小鼠对系统性MRSA感染具有保护作用。本研究拟在此基础上，利用天然抗体3B4及其转基因小鼠，体外实验分析天然抗体对MRSA生长、调理吞噬等的影响，体内实验观察抗体3B4在皮肤及系统性MRSA感染中的作用，并对其机制进行深入探索。本研究有助于进一步阐明天然抗体在MRSA感染中的作用，并为临床防治MRSA感染提供有益的思路。

本研究组在前期工作中获得了天然 IgM 型抗体 3B4，发现该抗体可以结合金黄色葡萄球菌，3B4 转基因小鼠对系统性 MRSA 感染具有保护作用。在前期工作的基础上，本课题组进一步检测了天然抗体 3B4 及其转基因小鼠抗MRSA的作用以及作用机制。.首先我们通过ELISA、流式细胞术以及免疫荧光三种不同的方法证实两者的结合。菌落形成实验发现发现可见3B4作用组形成菌落的数量相对于对照组数量显著减少。流式细胞术证实：单抗3B4作用组吞噬指数分别为49.3%，而对照组的吞噬指数为8.1%，进一步表明单抗3B4可以促进腹腔吞噬细胞对细菌的吞噬。.其次我们检测了天然抗体3B4抗系统MRSA感染的作用。小鼠腹腔感染细菌48 h内，3B4转基因小鼠的生存率为70%，而野生型小鼠的生存率仅为20%，表明3B4对金黄色葡萄球菌的感染有保护作用。腹腔接种金黄色葡萄球菌48h后，冲洗腹腔检测金黄色葡萄球菌菌落形成单位。转基因小鼠的菌负荷显著低于野生型小鼠；研磨肾脏和脾脏后铺板计数菌落，结果发现转基因小鼠肾脏和脾脏菌负荷也显著低于对照小鼠。MRSA感染后，IL-6, TNF-α以及 IFN-γ在两组小鼠中均有增高，但是相对于野生型小鼠，转基因小鼠中IL-6,以及TNF-α水平分别下降了49.1%和59.4%。同时发现，流式细胞仪检测腹腔冲洗液中性粒细胞比率，转基因小鼠腹腔中中性粒细胞比率为较野生型小鼠降低65.9%（P<0.01）。.再次我们对天然抗体3B4抗系统MRSA感染的作用机制进行了探讨。体外实验表明3B4可以结合MBL，并可以通过补体的经典途径以及MBL途径激活补体系统。通过在不同时间点，检测系统感染后CH50数值，发现天然抗体3B4正是通过激活补体系统发挥抗MRSA作用。.最后，课题组在阅读文献的过程中发现MRSA对肺癌的预后有重要影响。发现MRSA可能对肺癌细胞转移能力存在影响。MRSA可以促进A549细胞转移，TLR4在MRSA感染的A549细胞中表达增加。而MRSA通过激活TLR4/MyD88 信号增加A549细胞的转移能力。（本部分内容文章尚未发表）。