新的抑制剂对Nrf2介导非小细胞肺癌增敏的作用机理研究

转录因子NF-E2相关因子2（transcription factor NF-E2-related factor 2， Nrf2）属于转录因子中的cap'n'collar (CNC)家族，Nrf2是细胞调控抗氧化应激反应的重要转录因子, 在正常细胞的化学预防中起重要的作用, 但癌细胞核内Nrf2累积是肿瘤细胞获得耐药性的重要原因之一。1)课题组建立了一灵敏的、以Nrf2为分子靶标、以萤光素酶活力检测为手段的抑制剂筛选与检测方法，从小分子化合物库(Prestwick Chemical Library)己经筛选出一活性较强的类黄酮Nrf2抑制剂木犀草素(luteolin, L)。.本项目拟利用非小细胞肺癌细胞系A549 明确: A)L调控Nrf2的作用机制；B)体外研究L对Nrf2/ARE通路介导的肿瘤耐药作用机制；C) 通过裸鼠种植瘤实验验证L的增敏效应并明确相关机制。

转录因子NF-E2相关因子2（transcription factor NF-E2-related factor 2， Nrf2）属于转录因子中的cap‘n’collar (CNC)家族，具有一高度保守的碱性亮氨酸(bZIP)拉链结构。正常生理状态下, Nrf2与胞浆蛋白伴侣分子Keap1(Kelch-like ECH-associated protein1)相互结合而定位于细胞质中, Keap1同时可作为Cullin-3底物受体而促进Nrf2的泛素蛋白酶体途径降解过程。目前认为Nrf2是正常细胞调控抗氧化应激反应的重要转录因子, Nrf2缺失或激活障碍时会引起细胞对应激反应的敏感性增高, 加重氧化应激源的细胞毒性, 导致细胞功能障碍、凋亡甚至死亡。但是，Nrf2的异常激活与肿瘤的发生及耐药性密切相关，其抑制剂则具有增敏肿瘤细胞的潜力。本课题组利用一灵敏、以Nrf2-ARE为分子靶标、以萤光素酶活力检测为手段的细胞筛药平台，获取了Nrf2抑制剂类黄酮化合物木犀草素，在Caco2，H460，MCF7 和A549细胞中验证了木犀草素的抑制活性并进一步明确了其具有促进NRF2的mRNA降解的作用，使得NRF2及其调控基因表达均降低，与此同时，在非小细胞肺癌细胞A549中也检测到木犀草素增敏了抗肿瘤药物的作用。木犀草素对NRF2降表达的细胞株-siNRF2-c27-的增敏作用很小，这一研究表明木犀草素的增敏作用与其抑制NRF2的作用密切相关。本项目所建立的技术平台和人才梯队，将为今后多学科交叉合作进行药物开发和更深入的药物作用机制研究提供强有力的技术和人才支持。因此本项目不仅具有较高的科学价值，而且其研究成果将具有临床应用的前景并将产生具大的社会和经济效益。本项目共发表SCI收录论文1篇（它引8次，影响因子5.4），核心期刊收录论文3篇；培养硕士研究生3名。