激活NF-κB/Rho-kinase 和TGF-β/Smads信号传导通路在术后腹膜粘连形成中的研究

Postoperative peritoneal adhesions, which occur in the peritoneal cavity as a result of surgery or stimulation of foreign body, are the most frequent complication of abdominal surgery. Up to now, The research in this erea is still lack of intensive study, whether in foundation or application areas, especially in the erea of clinical therapy. Therefore, in order to solve this complicated problem, it is necessary to carry out the postoperative adhesion related basic research, especially the disease occurrence and the molecular mechanism in the formation and development process. Our proect is founded on the previous National Natural Science Foundation of China(The effect of traditional Chinese medicine Changtong Oral Liquid（CTOL） on the fibroblast cells derived from postoperative adhesion.No:30873271). The purpose of this study is to develop the roles of TGF-β/Smads and NF-κB/Rho/Rho-kinase signaling pathways in postoperative peritoneal adhesions and find their corresponding cross-talk binding sites, in order to reveal the relationship between inflammatory response, wound healing and fibrinolytic activity from the point of molecular studies in vivo and in vitro.These studies may have an enlightening and guiding significance for prevention and treatment in postoperative peritoneal adhesions and other peritoneal lesions.

术后腹膜粘连是指腹膜受到手术损伤与刺激后在脏器间、脏器与腹壁间产生的纤维性粘连。术后腹膜粘连在腹盆腔手术中发生率达90%，迄今为止，腹盆腔疾病术后粘连的相关研究均缺乏系统与深入研究，不管是基础、应用基础还是临床应用研究，几乎是空白。因此，开展术后粘连的相关基础研究，特别是该疾病发生、形成与发展过程中的分子机制，是解决这一复杂问题的根本。本项目拟在前国家自然科学基金（中药常通口服液对术后粘连成纤维细胞分子药理学作用机制研究，NO：30873271）研究基础上，进一步深入研究TGF-β/Smads和NF-κB/Rho/Rho-kinase信号转导通路所扮演角色，探寻他们之间交叉对话及相应调控靶点，从分子学角度揭示粘连发生过程中炎症反应、腹膜纤溶活性、伤口愈合等不同环节对术后粘连所表现出来的作用，为后期防治术后腹膜粘连提供新的防治策略和靶点，对以术后粘连为代表的腹膜病变具有一定启发性和指导意义。

项目研究目的：通过研究术后粘连防治新药常通口服液中的活性成分—TANS和AESS对术后腹膜粘连大鼠模型的治疗作用及其作用机制，揭示TGF-β/Smads及Rho/Rho-kinase信号通路在术后腹膜粘连形成中的关键作用。研究方法：①构建术后腹腔粘连大鼠模型，考察TGF-β/Smads和Rho/Rho kinase信号通路及下游相关蛋白在体内的变化情况；②采用人正常腹膜间皮细胞HMrSV5和粘连成纤维细胞AFB模型，并联合通路特异性激动剂及抑制剂对通路进行正向或负向调控，考察炎症因子（IL-1β）和转化生长因子（TGF-β1）诱导后，细胞内上述信号通路相关蛋白的变化。研究结果表明：TANS能通过抑制TGF-β/Smads信号通路的激活，减弱胶原取代纤维蛋白的过程，同时降低PAI-1对tPA的抑制作用；AESS则通过抑制Rho激酶的激活，直接刺激tPA的表达与分泌，加速了纤维蛋白的代谢溶解过程。通过对TGF-β/Smads和Rho/Rho-kinase信号通路的下调，TANS和AESS对术后腹膜粘连大鼠表现出良好的治疗作用。研究结果可为今后术后腹膜粘连的临床防治提供新的治疗策略与作用靶点。.围绕本项目研究，共计发表研究论文6篇，其中SCI论文3篇，中文期刊3篇；共培养研究生3名，其中博士研究生2名，硕士研究生1名；项目主要研究成果2017年获中国医药教育协会科技创新一等奖1项，项目组成员获中国医药教育协会优秀论文一等奖和紫禁城国际药师论坛优秀论文奖各1项，出版医学专著《腹盆腔术后粘连基础与临床》1部。