基于EGF/STAT3通路的前列宁胶囊治疗良性前列腺增生的机制研究

前列宁胶囊是福建中医药大学附属人民医院男科的临床验方制剂，用于临床治疗良性前列腺增生(BPH)20余年，具有显著的疗效，可有效改善病人尿频、尿急等症状，尿流动力学评价指标明显改善；但其作用机制不甚明了。前期实验研究发现前列宁胶囊可以改善前列腺增生的病理变化，能显著下调BPH组织的EGF、EGFR、Bcl-2及CyclinD1等基因的表达。最新研究表明，EGF/STAT3信号通路的激活与BPH的发生密切相关，这一发现为BPH的药物治疗提供了新的研究方向。本项目以EGF/STAT3信号调节通路为切入点，以良性前列腺增生的动物模型和细胞模型为研究对象，运用基因克隆、细胞转染、RT-PCR、Western Blot等方法，从形态学、基因和蛋白水平等层面系统地研究前列宁胶囊对BPH的治疗作用和对前列腺细胞EGF/STAT3通路的影响，以阐明其治疗BPH的分子机制和作用靶点，为临床应用奠定实验基础。

本研究采用HPLC分析建立前列宁胶囊的质控检测体系。采用去势后皮下注射丙酸睾丸酮复制良性前列腺增生（BPH）模型，以及体外培养前列腺细胞WPMY-1加以EGF刺激构建前列腺细胞细胞因子介导增生模型。通过对上述模型的干预研究前列宁胶囊治疗BPH的作用机制及靶点。动物实验结果显示前列宁胶囊能显著降低BPH大鼠的前列腺重量、体积及指数；减轻BPH大鼠前列腺组织增生性改变，呈现出剂量依赖；前列宁胶囊能显著诱导BPH大鼠前列腺组织细胞凋亡，抑制EGF、EGFR、Bcl-2、CyclinD1、CDK4和Stat3的mRNA和蛋白表达；促进Bax、p21的mRNA和蛋白表达；促进Caspase-3的剪切活化。细胞实验结果显示前列宁胶囊能够抑制EGF刺激前列腺细胞WPMY-1的增殖、活力，诱导细胞凋亡；增加Caspase-9、Caspase-3的活性；抑制STAT3的磷酸化及其转录活性；能够显著下调Bcl-2、Cyclin D1、CDK4的表达，上调Bax和p21的表达；以及可诱导高表达Bcl-2、Cyclin D1前列腺细胞的凋亡。研究结果表明“抑制EGF/STAT3通路”可能是前列宁胶囊治疗BPH的一个重要机制。. 此外，在此基础上课题组还研究发现前列宁胶囊可显著抑制BPH大鼠前列腺组织的血管新生，结果表明通过抑制HIF- 1α介导的VEGF-A、bFGF表达是其抑制血管新生的重要机制；前列宁胶囊可抑制BPH大鼠前列腺细胞外基质Collagen Ⅳ、FN和抑制睾酮（T）、雄激素受体（AR）的表达。研究结果证实了前列宁胶囊治疗BPH具有多靶点、多途径的作用特点。在本基金项目的资助下，课题组已发表前列宁胶囊相关论文9篇，其中SCI源论文6篇。