树突细胞源性exosome疫苗治疗实验性重症肌无力

本课题将建立实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）动物模型，用IL-10或他汀类药物诱导EAMG大鼠髓源树突细胞分泌耐受性exosome，分析其MHC-II、CD80、CD86和FasL的表达；体外研究耐受性exosome对乙酰胆碱受体抗原致敏T细胞增生的抗原特异性抑制作用；然后将耐受性exosome输给发病的EAMG大鼠，观察其在体内组织的分布和是否可以诱导EAMG免疫耐受，研究其对调节性T细胞、NK细胞、B细胞、T细胞增生和凋亡、Th1/Th2/Th17细胞因子分泌和抗乙酰胆碱受体抗体IgG及其亚型的影响；探讨耐受性exosome 是否通过其携有的FasL分子或依赖激活NK细胞途径来诱导免疫耐受。通过上述研究阐明IL-10或他汀类药物修饰的树突细胞分泌的exosome诱导EAMG免疫耐受的机理，为重症肌无力提供新的治疗方法和实验依据。

本课题组前期研究发现，阿托伐他汀可诱导不成熟树突状细胞（DC），这种耐受性DC疫苗可诱导实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠的免疫耐受，而本课题的研究重点在于探究他汀修饰的DC分泌的exosome（statin-Dex)对EAMG的影响。我们提取了他汀修饰的树突状细胞分泌的exosome，将其输入已发病的EAMG大鼠，观察大鼠的症状及临床评分，并进行了一系列的机制研究。研究发现，statin-Dex低表达MHCII 分子，高表达IDO分子，且这些statin-Dex明显抑制EAMG大鼠症状。示踪试验发现，statin-Dex主要分布于脾、胸腺及腹股沟、腘窝淋巴结。Statin-Dex下调内源性DC CD80、CD86和 MHC II 分子的表达。另外，statin-Dex诱导免疫耐受的机制与上调的IDO和Treg有关，并部分依赖于FasL/Fas通路，最终导致抗体产生减少。我们的结果显示，他汀修饰的不成熟DC可分泌耐受性exosome，诱导EAMG的免疫耐受。我们的研究为人类重症肌无力的治疗提供了新的思路和证据。