E.coli多质粒共存并介导第三代头孢菌素抗性的分子机理

如期较好的完成了课题。对E.coliHX88108株中四个头孢哌酮（CPZ）抗性质粒PFC、PFT1、PFT2、PFT3进行了抗性基因分子克隆和物理图谱构建，经过亚克隆最后得到-0.65kb的CPZ抗性基因片段，对该片段完成了序列分拆，证实四个CPZ抗性基因具有同源性。该抗性基因可在染色体与质粒间自由转移表达，四个CPZ抗性质粒也可在肠杆菌中转移和表达抗性。对抗性表达产物β-内酰胺酶的特性分析，发现E.coliHX88108及转化菌PFC、PFT1酶能有效水解头孢哌酮，对青霉素类及第一、二代头孢菌素有效强水解作用，而PFT2及PFT3酶对青霉素类的水解作用较强，对头孢菌素的水解作用较弱，因此认为PFC及PFT1是TEM型广谱酶，而PFT2及PFT3是青霉素酶。HX88108株CPZ抗性与膜蛋白无关。