书虱P450基因介导代谢抗性的分子机理研究

本项目拟在课题组前3项与书虱抗性有关的国家自然科学基金研究的基础上，瞄准国际上细胞色素P450与昆虫抗药性关系这一研究热点，以目前粮仓中严重危害的书虱类害虫嗜卷书虱为主攻对象，综合运用昆虫生理生化和分子毒理学等学科知识，利用细胞色素P450的可诱导性，比较研究书虱敏感品系、抗性品系及诱导品系对有机磷类常用杀虫剂及PH3的敏感性差异；应用RT-PCR及RACE技术克隆书虱P450基因的全长序列，结合Northern杂交和Real-time PCR技术解析其mRNA在嗜卷书虱不同发育时期和不同品系中的表达模式，找出与抗性相关的突变位点，并通过P450的异源表达分析表达产物（酶）的酶学特性；最后应用PCR-RFLP及Real-time PCR技术建立自然种群抗性的分子诊断技术。研究结果不仅在理论上揭示书虱P450介导代谢抗性的分子毒理学机理，在实践上对该类害虫抗性的综合治理也具有重要的指导意义。