脂氧素A4促进牙周组织炎症消退的作用机制

脂氧素A4（Lipoxin A4, LXA4）是近年新发现的一种内源性脂质介质，通过与中性粒细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞、成纤维细胞等多种细胞表面的LXA4受体结合抑制炎症性疾病的宿主炎症反应，促进炎症消退。前期工作观察到LXA4能有效抑制小鼠的牙周炎症，本项目主要研究侵袭性牙周炎患者T淋巴细胞分泌LXA4水平及其受体mRNA和蛋白的表达；采用ELISA方法检测外源性LXA4及其受体拮抗剂Boc-1对T淋巴细胞LXA4受体基因和蛋白表达、分泌产生细胞因子/趋化因子能力的影响，并探讨相关的信号转导途径；采用FACScan法观察LXA4诱导T淋巴细胞凋亡、增殖分化的能力。本项目旨从LXA4和T淋巴细胞表面受体介导的抗炎促消退效应的角度出发，研究牙周炎的炎症消退机制，为进一步揭示慢性炎症性疾病的炎症消退和终止机制以及开发炎症治疗新药提供一定理论基础。

采用标准程序收集30位侵袭性牙周炎患者（牙周基础治疗前后）和30名健康对照者的龈沟液（GCF）。采用ELISA法分别检测并分析比较GCF中脂氧素A4（LXA4），血栓素B2（TXB2），前列腺素E2（PGE2），白三烯B4（LTB4）的含量。记录患者四种临床指标如菌斑指数（PIL）,探诊深度（PD）,出血指数（BI）, 附着丧失（AL），检测LXA4变化与牙周临床指标的相关性。研究发现，治疗前AgP患者体内PGE2和TXB2水平明显高于健康对照组，牙周治疗后降低到正常水平。治疗前AgP患者体内LTB4和LXA4水平显著低于健康对照组，然而，在侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗后的恢复期呈现升高趋势。四种检查指标与牙周临床指标如 PIL, PD, BI, AL等无显著相关性。. 构建丝线结扎诱导小鼠牙周炎的模型，观察其牙槽骨骨吸收程度和激活破骨细胞的过程。观察脂氧素A4对小鼠牙周炎的体内抑制作用。方法：围绕左上第二磨牙结扎9-0丝线，未经处理的右上第二磨牙作为对照组；测量釉牙骨质界至牙槽骨嵴顶（CEJ- ABC）的距离监测牙槽骨的吸收。牙槽骨骨面的破骨细胞采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色并计数。注射脂氧素A4(0.1mg/ml)于实验组小鼠第二磨牙，测量CEJ-ABC的距离。采用单因素方差分析（ANOVA法）对所有数据进行统计学分析。结果：丝线结扎诱导的小鼠牙周炎模型在3，6，9和12周后的釉牙骨质界至牙槽骨嵴的距离分别为0.16 ± 0.04毫米，0.16 ± 0.02毫米，0.18 ± 0.03毫米，0.17 ± 0.02毫米，与对照组相比均有显著差异（P <0.05）。在丝线结扎一天后，牙槽骨表面的破骨细胞即被激活，在第3天达到高峰（12 ± 4个/mm，P <0.01）。在丝线结扎诱导的小鼠牙周炎模型中，脂氧素A4作用下的小鼠的牙槽骨骨吸收显著降低（P<0.05）。结论：丝线结扎术是一种迅速且有效的诱导小鼠牙周炎牙槽骨骨质丧失的方式，其诱导的破骨细胞活化在丝线结扎后24小时内发生。脂氧素A4作为一种新的脂类代谢物，可以抑制小鼠宿主的炎症反应。