SH2A在细胞内信号转导中的功能特性

本项目是在克隆了SH2A cDNA并分析了其表达特性的基础上，又构建了pSH2A-Myc重组表达载体，转染细胞，检测了TPK、MAPK和PKC 活性；根据所发现的PKC活性受到明显抑制这一现象，拟进一步鉴定其靶蛋白及信号转导途径，深入研究SH2A生物学功能特性；通过酵母双杂交技术筛查与SH2A相互作用的靶蛋白；构建SH2A和Myc标签重组的野生型和变异型表达载体，转染细胞；应用免疫共沉淀技术鉴定SH2A与靶蛋白的相互作用以及PLCgamma的磷酸化；本项目对新克隆的SH2A基因的深入研究及其功能鉴定，不仅可以为细胞内信号转导和药物靶标研发提供新的依据，而且有望发现与SH2A相互作用的新靶蛋白或靶蛋白新功能。