糖基化的EMMPRIN通过微囊泡调节RANKL/OPG致牙周破坏的机制研究

This application is a continuation of our series studies on host susceptibility to different host reactivity. The degree of EMMPRIN glycosylation reflects the self-regulation ability of the host response in periodontitis, but the mechanism of destruction from shallow to deep and transverse self-regulation is still unclear. On the basis of previous studies, this project proposed a scientific hypothesis: high-glycosylated EMMPRIN may act on the gingival fibroblasts and periodontal ligament cells through MVs, activate Wnt/beta-catenin signaling pathway, and then increase the ratio of RANKL/OPG and the secretion of MMPs, leading to periodontal inflammation and destruction. Therefore, this application aims to construct two models: a co-culture model simulating periodontal tissue and a rat periodontitis model. To explore: ① the molecular mechanism of high glycosylated EMMPRIN regulating RANKL/OPG in gingival fibroblasts and periodontal ligament cells, respectively; and ② the response mechanism of high glycosylated EMMPRIN regulating multipath synergy when cells from shallow to deep tissues receive instructions. This application combines MVs-mediated intercellular communication with the host network regulation of periodontitis, which is expected to improve the mechanism of host self-regulation and network regulation of periodontitis, and provide new evidence for the host susceptibility theory of periodontitis.

本申请是我们前期“不同宿主反应性反映牙周炎宿主易感性”系列研究的继续。EMMPRIN糖基化的程度反映了牙周炎时宿主反应的自我调控能力，但组织由浅至深的破坏机制和宿主的横向自我调控机制尚不明确。本项目在前期研究基础上提出科学假说：高糖基化的EMMPRIN通过微囊泡分别作用于牙龈成纤维细胞和牙周膜细胞，激活Wnt/β-catenin信号通路，升高RANKL/OPG的比值和MMPs的分泌，最终导致牙周炎症和破坏。本申请拟构建模拟牙周组织的细胞共培养模型和大鼠牙周炎模型，着重探讨：①高糖基化的EMMPRIN分别调控牙龈成纤维细胞和牙周膜细胞中RANKL/OPG的分子机制；②高糖基化的EMMPRIN参与由浅入深不同组织细胞接受指令后协同反应的调控机制。本申请将微囊泡介导的细胞间通讯与牙周炎的宿主网络调控作用结合，有望完善牙周炎宿主反应的自我调控机制和网络调控脉络，为牙周炎的宿主易感性理论提供新证据。

本申请是我们前期“不同宿主反应性反映牙周炎宿主易感性”系列研究的继续。EMMPRIN糖基化的程度反映了牙周炎时宿主反应的自我调控能力，但组织由浅至深的破坏机制和宿主的横向自我调控机制尚不明确。本项目在前期研究基础上，通过构建细胞共培养模型和大鼠牙周炎模型研究宿主因素在牙周炎中的调控机制，以承载糖基化 EMMPRIN 的 MVs 为切入点，探究高糖基化的 EMMPRIN 分别调控牙龈成纤维细胞和牙周膜细胞中RANKL/OPG 的分子机制以及高糖基化的 EMMPRIN 参与由浅入深不同组织细胞接受指令后协同反应的调控机制。研究明确了细胞内高糖基化的 EMMPRIN 与 MVs 的富集和 MVs内EMMPRIN 的表达量相关；明确了糖基化的 EMMPRIN 可以调节靶细胞 RANKL/OPG 和 MMPs 的表达，并初步探究了其调节机制；明确了降低 EMMPRIN 的糖基化可以减轻牙周破坏；明确了牙周炎患者存在总体甲基化水平以及EMMPRIN、GnT-V分子的基因甲基化位点和水平的差异。本项目将微囊泡介导的细胞间通讯与牙周炎的宿主网络调控作用结合，期望完善牙周炎宿主反应的自调控机制和网络调控脉络，为牙周炎的宿主易感性理论提供新证据。