蒙药清肝9味散通过MAPKs通路调控MMPs/TIMPs体系抗肝纤维化的作用及机制研究

Liver fibrosis is a key prossess in the development from chronic hepatitis to cirrhosis of the liver pathological process, There are a lot of hepatitic cirrhosis patients in our country, and the case fatality rate is high, it is one of the common disease which endangering human health, so its pathogenesis and treatment has become a hotspot in the field of liver disease research.Studies have shown that hepatitic fibrosis can be reversed in some extent, so that the "chronic hepatitis - hepatitic fibrosis - hepatitic cirrhosis - liver cancer," the progress of the process may be terminated.The activation of hepatic stellate cells (HSC) is a key link in the process of liver fibrosis, and proliferation of hepatic stellate cells plays an important role in the regulation of MMPs / TIMPs.The signal transduction associated with HSC activation mechanism is a common research focus.After our long-term research and clinical work ,Qing Gan Jiu Wei San has a definite therapeutic effect on liver fibrosis patients. In this study, we used the drug to treat rat model of hepatic fibrosis and detect the serum markers related to hepatic fibrosis. Meanwhile, we observed the changes of MMPs / TIMPs in liver tissue and cell culture medium of drug intervention and its correlation with MAPKs signal pathway Protein and the MAPKs related proteins were screened and verified. It is expected that this study will clarify the mechanism of Mongolian medicine Qing Gan Jiu Wei San in the treatment of liver fibrosis, and provide scientific basis for the treatment of liver fibrosis.

肝纤维化是慢性肝炎发展至肝硬化的必经病理过程,肝硬化在我国发病率居高不下，且病死率高，是危害人类健康的常见疾病之一，因此其治疗和发病机制成为了肝病领域的研究热点。研究表明，肝纤维化在一定程度上可以逆转,从而使"慢性肝炎-肝纤维化-肝硬化-肝癌"这一进展过程得以终止。肝星状细胞(HSC)的活化与增殖是肝纤维化发生的关键环节,对MMPs/TIMPs体系的调节起着重要作用。目前与HSC活化有关的信号转导机制是普遍的研究焦点。我们通过长期的临床工作及前期研究中发现，蒙药清肝九味散对肝纤维化患者有着确切的治疗作用。此次研究应用该药物治疗肝纤维化大鼠模型，检测肝纤维化相关血清学指标，同时观察药物干预的大鼠肝脏组织和细胞培养液中MMPs/TIMPs体系的变化及其对MAPKs信号通路相关蛋白的影响，并对MAPKs通路相关蛋白进行筛选、验证。期望通过该研究能明确蒙药清肝九味散治疗肝纤维化的作用机制

项目的背景.肝纤维化是肝脏细胞外基质异常沉积的病理过程，在我国发病率居高不下，是危害人类健康的常见疾病之一，但由于其复杂的机制，现阶段尚无非常有效的逆转肝纤维化的药物。蒙药清肝九味散治疗肝病的历史悠久，治疗效果稳定，副作用少，我们通过前期实验研究发现，蒙药清肝九味散对肝纤维化患者有着确切的治疗作用，但其抗肝纤维化的具体作用靶点、通路等作用机制尚缺乏深入的研究。.主要研究内容.（一）蒙药清肝九味散对肝纤维化大鼠的治疗作用.使用蒙药清肝九味散对肝纤维化模型大鼠进行灌胃治疗，蒙药清肝九味散可以改善大鼠一般状态及肝组织病理学表现，明显降低肝生化指标及肝脏纤维化相关蛋白表达，说明该药物对肝纤维化具有治疗作用。 .（二）蒙药清肝九味散抑制肝星状细胞活化.为了进一步探索蒙药清肝九味散的抗纤维化作用机制，我们分离了大鼠原代肝HSCs，并使用药清肝九味散含药血清进行干预。蒙药清肝九味散降低肝星状细胞中α-SMA和COL1的表达，使细胞周期阻滞在G0/G1期并影响细胞增殖并诱导其凋亡，从而限制了细胞活化过程，达到抗肝纤维化的作用。 .（三）蒙药清肝九味散对MAPKs通路的影响.经蒙药清肝九味散治疗后，大鼠肝组织以及肝星状细胞中p38、JNK和Erk1/2的磷酸化水平显著下调，提示蒙药清肝九味散治疗肝纤维化的作用机制可能与调节MAKP通路有关。.重要结果.在动物模型中，蒙药清肝九味散可以改善肝脏中胶原纤维沉积，调节肝脏 MMPs/TIMPs 体系，促进 ECM 的降解；在原代肝星状细胞中，清肝九味散使细胞周期阻滞并影响细胞增殖、凋亡，从而限制了星状细胞活化过程，达到抗肝纤维化的作用。同时该药物抑制模型动物肝脏及肝星状细胞中MAPKs 信号通路相关蛋白的表达，提示该药物可能通过调节MMPs/TIMPs 体系及 MAPKs 通路达到抗肝纤维化的作用。.科学意义.在本次课题中，我们通过动物模型及细胞实验验证了该药物对肝纤维化的治疗效果，探索了该药物抗肝纤维化的作用机理，为蒙药的深入研究提供理论依据，对于发挥蒙医药的治疗优势，推广其临床应用具有重要意义。