基于治疗肝纤维化蒙药德都红花-7味散调节HSC细胞增殖活化及功能的机制研究

Mongolian Medicine DeDuHongHua-7 powder had surely therapeutic effect on chronic hepatitis and chronic hepatic fibrosis, and can significantly decreases the HA, LN, PCIII, IVC, Hyp levels of serum and liver, consider that it may affect the TGF-β1/smad pathway and function of HSCs to act the anti liver fibrosis role. In this project, the experimental models of hepatic fibrosis was induced by CCl4, and intervened by DeDuHongHua-7 powder, then the fluorescence quantitative PCR, western blotting, flow cytometry were used to measure TGF-β1, TGF-β1mRNA expression, TGF-β1/smad pathway and MMP-1,MMP-13,TIMP-1 secreted by HSCs, expressions of collagen I mRNA, collagen III mRNA, which were indicators affect the proliferizition and activation of HSCs, to discover its mechanism of anti fibrosis function, provide scientific basis to DeDuHongHua-7 powder's treatment effect on liver fibrosis.

蒙药德都红花-7味散治疗慢性肝炎肝纤维化疗效确切，具有明显降低血清和肝组织HA、LN、PCⅢ、ⅣC、Hyp含量的作用，认为治疗机制可能是调节HSC细胞增殖活化或影响HSC细胞功能起到抗肝纤维化作用。本项目拟采用CCI4诱导实验性肝纤维化模型，用蒙药德都红花-7味散干预，采用荧光定量PCR技术、蛋白印迹技术、流式细胞技术，研究德都红花-7味散对HSC细胞增殖活化发挥调节作用的TGF-β1和TGF-β1mRNA表达的效应及TGF-β1/smad通路的影响，以及对HSC细胞分泌MMP-1、MMP-13、TIMP-1功能和I型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA表达的调节作用,揭示其抗纤维化作用机制，为蒙药德都红花-7味散治疗肝纤维化提供科学依据。

本项目采用CCI4诱导实验性肝纤维化模型，用蒙药德都红花-7味散干预，采用荧光定量PCR技术、蛋白印迹技术、流式细胞技术，研究了德都红花-7味散对HSC细胞增殖活化发挥调节作用的TGF-β1和TGF-β1mRNA表达的效应及TGF-β1/smad通路的影响，以及对HSC细胞分泌MMP-1、MMP-13、TIMP-1功能和I型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA表达的调节作用,揭示其抗纤维化作用机制，为蒙药德都红花-7味散治疗肝纤维化提供科学依据。.研究结果：①蒙药德都红花-7味散治疗肝纤维化疗效确切，可明显减轻CCI4所致肝纤维化模型肝细胞变性、坏死和气球样变性、脂肪变、降低胶原纤维和网状纤维的行成，减少假小叶的行成。②蒙药德都红花-7味散可明显降低CCI4所致肝纤维化模型血清ALT、AST、升高白球蛋白比值，减低血清TG；降低血清III型前胶原、IV型胶原、HA，降低肝组织匀浆IV型胶原、HA的含量。③蒙药德都红花-7味散明显提高CCI4所致肝纤维化模型肝组织MMP-1、MMP-13蛋白表达，减少TIMP-1的蛋白表达，表明德都红花－7味散具有调节和维持MMP/TIMP的稳态的作用。④蒙药德都红花-7味散可降低CCI4所致肝纤维化模型肝组织中TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达，提高Smad6、Smad7蛋白表达。⑤蒙药德都红花-7味散具有明显降低CCI4所致肝纤维化模型肝组织TGF-β1mRNA、I型胶原mRNA、III型胶原mRNA表达作用。⑥蒙药德都红花-7味散含药血清能够明显促进肝HSC细胞凋亡，阻断HSC细胞由G0/G1期进入S期和从S期进入G2M期，达到抑制HSC细胞增殖。.蒙药德都红花－7味散对CCI4所致肝纤维化具有明显的治疗作用，其机制与调节转化生长因子/smad蛋白通路，调节MMP/TIMP的稳态，抑制星状细胞分泌细胞外基质的合成，促进细胞外基质的降解，阻断TGF－β表达和抑制Ⅰ型胶原mRNA和Ⅲ型胶原mRNA、TGF－β1mRNA的转录，抑制HSC细胞增殖、促进肝HSC细胞凋亡相关。