亚低温对缺血性脑损伤microRNA表达谱的影响及机制研究

①.miRNA(microRNA)作为基因表达调控的一种重要方式，参与缺血性脑损伤中细胞的凋亡、再生、免疫炎症反应等生物学行为。在缺血性脑损伤中，局部亚低温治疗以其独特的治疗方式和有效性倍受关注，但亚低温对缺血性脑损伤miRNA表达谱的影响及机制尚未见报道。②我们近期研究发现，给予亚低温脑保护后，大鼠脑组织miRNA表达谱发生变化，如与细胞凋亡和能量代谢相关的miR-15b和甲基化相关的miR-598-3p等表达下降，提示亚低温通过调控miRNA的表达对缺血性脑损伤发挥保护作用。③ 本项目采用大鼠大脑中动脉梗塞模型和局部亚低温处理，检测脑组织miRNA表达谱的变化，寻找发挥重要作用的miRNA并进行靶基因预测；应用荧光素酶报告系统和转染等方法，阐明显著差异表达的miRNA对其靶基因的调控机制，为亚低温治疗缺血性脑损伤提供理论基础，也为脑缺血治疗和药物筛选提供新思路、新途径和新靶标。

miRNA(microRNA)作为基因表达调控的一种重要方式，参与缺血性脑损伤中.细胞的凋亡、再生、免疫炎症反应等生物学行为。在缺血性脑损伤中，局部亚低温治疗以其独特的治疗方式和有效性倍受关注，但亚低温对缺血性脑损伤miRNA表达谱的影响及机制仍不清楚。本项目采用大鼠大脑中动脉梗塞模型和局部亚低温处理，检测脑组织miRNA表达谱的变化，基因芯片检测从800个候选的大鼠miRNA中, 筛选出63个差异表达miRNA, 其中，低温4h组表达上调的有6个,表达下调的有6个；低温24h组表达上调的有41个,表达下调的有10个。选取10个显著变化的miRNA进行荧光定量PCR验证，并对其中变化显著的miR-291b的作用在小鼠中进行验证。此外，本项目证实miR-124在小鼠脑缺血早期缺血半暗带区表达上调，并预测凋亡抑制因子iASPP可能是miR-124的靶基因，进一步通过荧光素酶报告系统鉴定iASPP是miR-124的直接作用靶点；通过转染miR-124类似物及抑制剂在体内和体外验证miR-124靶向iASPP在脑缺血中发挥的重要调控作用。此外，研究证实miR-124靶基因iASPP通过抑制p63/p73依赖性凋亡在脑缺血亚低温保护中发挥重要保护作用。项目为亚低温治疗缺血性脑损伤提供理论基础，也为脑缺血治疗和药物筛选提供新思路、新途径和新靶标。