IL-21/IL-21R信号途径对B10细胞诱导肾移植免疫耐受调控机制的研究

Results were different when B cells were deleted in autoimmune disease model and in clinical practice, some reports showed that it may aggravate disease severity when B cells were deleted. B cells have been recently confirmed to negatively regulate autoimmunity and inflammation in numerous mouse models.Il was confirmed that B cell participated with immune tolerance, but no study showed that B10 cell may stimulate immunological tolerance. It can prolong the graft survival when B10 infusion after B cells deletion in our small sample study. Augmentation of IL-21/IL-21R can promote proliferation of B10 cell and secretion of IL-10 in autoimmune disease. B10 cell induce immune tolerance via IL-10 through expression of FoxP3+T. No report was seen about B10 cell and transplant. Our study was performed by B10 cell infusion after B cells deletion, intraperitoneal injection IL-21 or IL-21R.Fc was given to augmentation or antagonism of IL-21/IL-21R signal, to clarify B10 cells on immune tolerance and regulatory effect by IL-21/IL-21R on B10 cells.

清除B细胞在自身免疫性疾病基础和临床研究中疗效不一，有报道去除B细胞不但达不到治疗目标，反而加重病情。B10细胞已被证实在自身免疫性疾病中，具有负向调控免疫应答作用。 在移植领域B细胞参与移植免疫耐受， 但未见B10细胞诱导免疫耐受。申请者前期小样本试验研究提示去除B细胞后再输注B10细胞可以延长小鼠移植肾的存活。在自身免疫性疾病中增强IL-21/IL-21R信号可以促进B10细胞的扩增和 IL-10的分泌，B10细胞通过IL-10途径调节FoxP3+T细胞表达诱导免疫耐受，但在移植领域中未见报道。 本研究通过小鼠肾移植模型，清除B细胞后再输注不同剂量的B10细胞， 同时注射IL-21或IL-21R.Fc增强或拮抗IL-21/IL-21R信号， 明确B10细胞具有诱导免疫耐受及是否有量效关系，从体内外实验明确IL-21/IL-21R信号对B10细胞的调控作用。

背景：调节性b细胞（b10细胞）在移植诱导免疫耐受不清楚。IL-21/IL-21R信号可以促进调节性b细胞（b10细胞）的扩增和 IL-10的分泌，自身免疫性疾病中B10细胞通过IL-10途径调节FoxP3+T细胞表达诱导免疫耐受，但在移植领域中未见报道。从体内外实验明确IL-21/IL-21R信号对B10细胞的调控及移植免疫耐受的作用。 .方法：体外b10细胞和CD4+T在IL-21和IL-21R.Fc刺激， 检测细胞因子变化。体内实验，供体Balb/c小鼠肾脏移植给受体C57BL/6, 术前输注1*106b10细胞， 同时注射IL-21或IL-21R.Fc增强和拮抗IL-21/IL-21R信号途径， 观察其外周血和脾脏B细胞、 CD4+T细胞、调节性t细胞、b10细胞的变化；外周血、脾脏、移植肾组织细胞因子变化以及移植肾病理改变和移植肾、脾脏RNA全基因组表达异常。.结果：体外培养研究提示IL-21降低IL-4、IFN–γ细胞因子的表达、增加IL-10细胞因子的表达。b10细胞输注后增加外周血b10细胞的数量，未见脾脏 b10细胞的增加；b10细胞联合IL-21注射增加脾脏CD4+T细胞和B细胞数量， b10细胞输注联合或不联合IL-21信号增强均未见对外周血及脾脏调节性t细胞的表达；IL-21单纯注射明显增加了外周血IL-6细胞因子的表达，明显降低il-4细胞因子的表达， 联合b10细胞输注逆转对两细胞因子的表达；IL-21单纯注射降低了移植肾IL-21表达，但明显增加了其在脾脏的表达，联合b10细胞输注逆转脾脏IL-21表达；尽管没有统计学差异， 单纯IL-21注射排异的发生增加。 移植肾RNA全基因组分析提示IL-21注射增加了Gm10260基因、Gm43302基因、Enolb基因表达。.结论：IL-21注射增加移植肾排斥的发生倾向，b10细胞输注可逆转排斥的发生。 体内外研究提示 IL-21注射增加排斥与免疫从th2向th1偏移有关， 而与调节性t细胞无关。