硒诱导内质网应激调控白血病细胞自噬与调亡作用的机制

前期工作发现亚硒酸钠可以引起白血病NB4细胞氧化应激（ERs），导致NB4细胞凋亡。证明ERs相关凋亡通路的关键节点蛋白在ERs诱导的凋亡过程中起重要作用，并揭示了相关分子机制。最近发现了ERs诱导的细胞凋亡与自噬密切相关，并初步证明抑制细胞自噬可促进ERs诱导的NB4细胞凋亡。本项目将在前期工作的基础上，深入研究硒诱导的ERs诱导NB4细胞的自噬与凋亡之间的相互关系。筛查和鉴定影响细胞自噬和凋亡两种细胞命运的基因与蛋白质。揭示ERs引发的的未折叠蛋白（UPR）信号通路及死亡相关蛋白激酶（DAPK）对NB4细胞自噬与凋亡两种细胞途径之间的转换过程的调控作用。深入了解相关的分子机制。为阐明亚硒酸钠诱发的ERs如何调节NB4细胞自噬途径向凋亡途径转换提供理论和实验依据。为白血病的治疗提供新的药物靶标。

本申请项目深入研究亚硒酸钠在不同细胞（白血病和结直肠癌细胞）中对于自噬与凋亡的转换调控作用，深入探讨了不同细胞中自噬对药物诱导凋亡的影响。获得了创新性研究结果。.1.发现细胞自噬在硒诱导凋亡过程中发挥不同作用。 亚硒酸钠有效诱导三株白血病细胞发生凋亡，在此过程中细胞自噬改变水平有所不同。.2.发现NB4细胞中自噬抑制增加了细胞对药物的敏感性。 改变NB4细胞内自噬发生状态，影响亚硒酸钠对细胞的致死效应；抑制细胞自噬促进硒诱导的细胞凋亡。.3.应用自噬芯片筛选出自噬关键调控蛋白Hsp90，发现p53介导的Hsp90表达下调通过IKK/NFκB/Beclin1调控自噬。NB4细胞中，亚硒酸钠诱导活化的p53抑制Hsp90表达，通过与IKK解离降低了NFκB核转位与活性，进而影响了自噬关键基因becn1转录进程，NB4细胞自噬水平降低。.4.亚硒酸钠诱导PP2A对DAPK的活化促进HL60自噬性死亡。 HL60细胞中，硒促进PP2A活化后引起DAPKSer308去磷酸化活化，促进自噬伴随凋亡而发生。.5.发现硒可降低结直肠癌β-catenin及cyclin D1的表达水平，AKT/FOXO3a/Bim 信号通路是硒诱导结直肠癌细胞凋亡的重要途径。结直肠癌细胞和裸鼠动物模型癌组织研究结果均一致。