Th17细胞在急性GVHD发生中作用机制的研究

移植物抗宿主病（GVHD）是造血干细胞移植的主要并发症，是一种免疫病理损伤，其机理及预防治疗手段受限于现代免疫学研究进展。Th17细胞是免疫研究中新近发现的CD4+T细胞的新亚群，主要参与感染、自身免疫性疾病等炎性反应；与Th1、Th2和Treg细胞间形成网络，相互调节，共同维持机体免疫平衡。GVHD是一正向免疫应答过程，T细胞是应答中重要成分，原有研究仅限于Th1、Th2和Treg间的探索，Th17细胞的作用鲜为所闻。因此，本课题拟在已有T细胞及Treg细胞研究的基础上，利用Th17缺陷小鼠以及正常小鼠建立Th17正常、缺陷及高含量三种GVHD模型，探索Th17细胞在GVHD中的作用，解析CD4+T细胞亚群在GVHD发生作用的时相性、相互作用及作用机理。若获成功，则为进一步深入了解造血干细胞移植后的免疫平衡奠定基础，并为GVHD的预防和治疗提供新思路。

探索Th17在小鼠异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后移植物抗宿主病（GVHD）发生中的作用，并尝试利用基因重组技术制备和纯化基因工程Th17细胞。结果：① allo-HSCT后，Th17细胞与GVHD总体严重程度呈负相关。②allo-HSCT后，Th1/Th17率和小肠病理学评分呈正相关关系，Th1比例与肝脏病理学评分呈正相关关系，Th17细胞比例和肺脏病理学评分呈正相关关系。③阻断Th17加重系统性aGVHD，主要表现为肠道损伤加重；但可减轻皮肤GVHD表现。④ 利用肺过表达IL-17的转基因小鼠模型证实，IL-17能够促进allo-HSCT后GVHD相关性肺病变。⑤IL-17加重allo-HSCT后GVHD相关性肺病变的机制是增加趋化因子表达促进炎性细胞招募，在这一过程中Th1细胞可能起协同作用。⑥联合导入RORγt与细胞因子TGF-β+ IL-6体外处理可获得了更高Th17细胞得率，获得的Th17细胞具有类似天然Th17细胞的表型和功能，经分选后纯度可达90%以上。⑦ Blimp-1不是Th17细胞发育分化所必需的细胞因子。⑧Th22 细胞是参与GVHD的病理过程的新型辅助性CD4+T 细胞亚群；Th22 细胞以IL-22 为效应因子，其数量随GVHD 的发生和转归动态变化。意义：基本阐明了Th17细胞对GVHD发生的影响及作用机制，拓展了对Th17细胞参与调控肺、小肠等组织器官GVHD相关免疫病理损伤的认识，可为GVHD的防治提供新思路。利用新策略制备了高纯度的工程Th17细胞，可为后续研究提供有价值的研究工具。此外，对Blimp-1和IL-22的研究拓宽了本课题的研究视角，获得了新的研究增长点。