siglec-1作为一种潜在的新型巨噬细胞脂质吞噬受体在动脉粥样硬化炎症反应和血管内皮黏附中的作用研究

Siglec-1（Sn）表达于特定组织巨噬细胞（Mφ）胞膜，在多种炎症和自身免疫性疾病中表达增加，参与介导炎症反应和T细胞活化。冠心病是一种炎症性疾病，单核巨噬细胞广泛参与其发病各阶段，但Sn在冠心病中的作用尚未见报道。本课题前期研究发现，冠心病人外周血Sn表达增加，并与疾病严重程度和活动度呈正相关，ox-LDL能刺激其表达上调，增强MCP-1、MIP-1及IL-8的分泌和脂质吞噬，而RNA干扰后上述作用减弱。因此我们推测：Sn可能作为ox-LDL独立受体或与其他受体协同作用，参与Mφ吞噬脂质变成泡沫细胞并提高其分泌细胞因子能力，募集并激活T淋巴细胞，还可能参与单核细胞黏附血管内皮细胞，参与粥样硬化炎症过程。为此，我们拟从外周血表型分析，细胞培养和动物实验三个层次，Sn抑制和表达增强两方面对其在冠心病中的作用及机制进行研究，为冠心病的预防和治疗提供新的思路。

Siglec-1是一种细胞间粘附分子，主要表达于单核巨噬细胞表面，通过介导炎症反应和激活T细胞等参与多种炎症和自身免疫性疾病发病。冠心病作为一种炎症性疾病，单核巨噬细胞广泛参与其发病各阶段，而Siglec-1在冠心病中的作用少见报道。本项目通过外周血表型分析，细胞培养和动物实验三个层次，siglec-1抑制和表达增强两方面对其在冠心病中的作用及机制进行了较为详细的研究，结果发现：（1）Siglec-1在AS患者外周血表达增强，并与疾病活动度评分及冠心病危险因子hs-CRP、同型半胱氨酸呈正相关，干扰Siglec-1表达能抑制巨噬细胞吞噬脂质和分泌趋化因子，并能抑制巨噬细胞刺激T淋巴细胞活化和增殖；（2）同时，氧化因子ox-LDL能以剂量依赖性刺激巨噬细胞SR-BI、LOX-1、TLR-4、CD64、CD32B、Siglec-1等受体表达，反之，抑制Siglec-1表达能降低巨噬细胞吞噬oxLDL，并且通过激光共聚焦和免疫共沉淀等技术证实Siglec-1和CD64或SR-BI能在巨噬细胞表面共定位，因此我们推测Siglec-1可能作为oxLDL的共受体之一参与脂质吞噬；（3）动物实验中，我们成功构建小干扰siglec-1慢病毒载体Lv-shSiglec-1并证实其体内外干扰活性，将其注射入apoE小鼠体内对Siglec-1进行干扰研究，发现siglec-1干扰后能明显抑制小鼠动脉粥样硬化斑块形成，减轻动脉粥样斑块中CD4、CD8和巨噬细胞等炎症细胞浸润及IL-1β、TNF-α等炎性细胞因子分泌。（4）并且，通过单核细胞和血管内皮细胞粘附实验发现，Siglec-1在单核细胞和动脉内皮细胞粘附之间可能起一定作用，体内干扰Siglec-1能降低单核细胞和内皮细胞对ox-LDL 的反应性，并抑制主动脉CXCL2 和 MCP-1表达，抑制单核细胞CCR2 和 CXCR2表达，通过MCP-1/CCR2 和 CXCL2/CXCR2通路降低单核细胞和血管壁之间的粘附作用。综上，对Siglec-1在冠心病中的基础理论研究将有助于为临床治疗冠心病提供新的免疫学思路。