利用逆转录病毒研究肿瘤间质细胞的基因不稳定性

肿瘤细胞与其微环境的关系犹如"种子"和"土壤"。以往绝大多数研究集中于肿瘤细胞的基因突变，而近年来越来越多的目光投向了肿瘤细胞赖以生存的微环境，即肿瘤间质细胞及其分子产物。大量研究表明，逆转录病毒在哺乳类动物基因组的随机插入，不仅是系统进化也是个体发育过程中的一个常发事件，而插入引起的突变也是导致细胞癌变的一个重要因素。.本项目拟利用逆转录病毒随机插入基因组这一特性来转染小鼠胚胎干细胞，获得一个包含多种基因突变的细胞库。通过与肿瘤细胞共注射，研究胚胎干细胞在肿瘤内的分化，肿瘤间质的形成；间质细胞（排除自身恶变细胞）的基因突变与肿瘤生长和转移的关系；发现并鉴定肿瘤间质细胞分子靶标；分析突变基因的功能并探讨作用机制。阐明间质细胞基因不稳定性在肿瘤发生中的作用，不仅有助于肿瘤学基础研究，更有可能为临床诊治提供新的分子靶标和治疗手段。

除恶变的肿瘤细胞外，肿瘤微环境对肿瘤发展的影响越来越受到关注。间质成纤维细胞作为肿瘤微环境的重要组分，已发现其基因不稳定（突变或表达异常）能够促进肿瘤生长。系统的发现肿瘤间质细胞中促进肿瘤发展的基因改变，并研究其作用机制将为靶向间质细胞的肿瘤治疗策略提供新的依据。. 逆转录病毒介导的插入突变策略是用于筛选突变基因的一种重要方法。本项目利用逆转录病毒插入筛选策略，构建逆转录病毒转染的MEF细胞库，与肿瘤细胞共注射后，分离肿瘤组织中的间质成纤维细胞并鉴定其病毒插入位点，通过构建目的基因的RNAi及过表达载体，验证目的基因的生物学功能。. 目前，已经鉴定出23个可能与间质成纤维细胞促进肿瘤生长相关的基因；进一步研究发现间质成纤维细胞中微管酪氨酸连接酶（tubulin tyrosine ligase, TTL）的表达下调，可能通过依赖于IL-6的促炎症反应，促进肿瘤生长。. 在本基金的资助下，已发表5篇SCI论文，培养1名硕士研究生和2名博士研究生，相关工作也多次在国际会议上发表。