孕早期蜕膜基质细胞与髓系抑制细胞的交互对话机制

It is essential for the maternal-fetal tolerance that a large number of immune cells infiltrated into the decidua and its phenotype and function were reprogrammed by the decidual stromal cells during early pregnancy when the close connection between the placenta and the mother has not been fully established ,and its imbalance will lead to abortion.Our previous study showed that MDSCs, as a new type of decidual immune cells, maintain maternal-fetal immune tolerance in its undifferentiated state.In addition,deidual MDSCs cells also promote migration of decidual stromal cells. In view of this, we propose decidual MDSCs and stromal cells may have cross-talk to participate in maintenance of maternal fetal immune tolerance. Therefore, this study will reveal the effect of MDSCs on the proliferation and invasion of decidual stromal cells and explore the role of decidual stromal sells in the enrichment, phenotypic differentiation and functional regulation of MDSCs using the mouse model of spontaneous abortion and clinical tissue specimens via adopting multiple method ssuch as microarray, siRNA, adoptive transfer and etc. The expected results will disclose the mechanism of cross-talk between MDSCs and decidual stromal cells at the maternal fetal interface, which can provide a scientific basis for exploring new diagnostic and therapeutic methods of unexplained recurrent spontaneous abortion.

孕早期胎盘与母体的紧密联系尚未完全建立时，蜕膜组织中大量免疫细胞的浸润及蜕膜基质细胞对其表型与功能“再编程”是这个时期母胎免疫耐受形成的关键，其失衡会导致流产的发生。我们前期研究明确MDSCs细胞是存在于蜕膜中除经典免疫细胞之外的一种新型细胞亚群，其通过保持未分化状态维持母胎免疫耐受，进一步研究发现蜕膜基质细胞参与维持MDSCs细胞未分化表型，MDSCs细胞也可促进蜕膜基质细胞的迁移。鉴于此，我们提出蜕膜基质细胞与MDSCs细胞可能存在交叉对话来参与孕早期母胎免疫耐受维持的假说。本研究拟采用自然流产小鼠模型和临床组织标本，通过microarray、siRNA 、流式细胞学等方法，解析蜕膜基质细胞对MDSCs细胞募集、表型及活化的调控机制及MDSCs细胞对蜕膜基质细胞增殖、运动的生物学行为影响。预期结果将明确蜕膜基质细胞和MDSCs细胞的交互对话机制，为探索人类复发性流产的治疗提供科学参考。

髓系抑制细胞（MDSCs）是存在于蜕膜中除经典免疫细胞之外的一种新型细胞亚群，在母胎免疫耐受中发挥重要作用。基质细胞（DSC）作为蜕膜组织微环境的主体细胞，能分泌多种细胞/趋化因子对蜕膜浸润的大量免疫细胞的表型和功能进行重新“编程”，其局部免疫应答异常是不明原因复发性流产（URPL）发生的重要因素。我们成功分离蜕膜基质细胞和MDSCs细胞，采用基因表达谱芯片分析正常早孕女性以及URPL患者蜕膜基质细胞及MDSCs细胞差异表达基因。与正常妊娠妇女相比，URPL患者蜕膜基质细胞中1300个基因的表达量发生明显变化，其中有940个基因表达上调，360个基因表达下调，通过GO及KEGG分析显示URPL患者基质细胞蜕膜化障碍，具体为：过度蜕膜化，使之接受异常胚胎的能力增加; 对免疫细胞的迁移、分化障碍; 对滋养细胞的粘附、侵袭障碍。MDSCs细胞基因组表达谱芯片分析显示，MDSCs细胞中163个基因的表达量发生明显变化；其中 67个基因表达上调，96个基因表达下调；URSA患者蜕膜MDSCs中Toll样受体信号通路、凋亡通路、白细胞相关激活炎症反应通路、噬菌囊泡通路等存在基因富集，与细胞外基质相互作用、TGF-β信号通路、粘附分子介导激活通路以及生长因子结合通路等富集水平明显低于正常早孕蜕膜MDSCs，这提示URPL患者蜕膜中的MDSCs与细胞外基质和其他细胞间的相互作用功能下降，表明其功能在一定程度上受到了损害。建立MDSCs 细胞与蜕膜基质细胞的共培养体系。研究发现MDSCs细胞通过直接接触方式促进蜕膜基质细胞的迁移；蜕膜基质细胞通过间接接触方式参与调控MDSCs细胞的表型维持。过继转输MDSCs细胞可以降低流产小鼠的胚胎丢失率。我们的研究分别揭示了URPL患者蜕膜基质细胞、MDSCs细胞的特点，及早孕期蜕膜基质细胞与MDSCs细胞的交互对话机制，预期结果为探索新的人类URPL治疗靶点提供科学依据。