组蛋白去乙酰化酶HDAC9对树突状细胞功能的调节作用

The researches about the functional regulation mechanisms of dendritic cells (DCs) have been the key frontiers of immunological research. For the more understanding about how DCs regulate adaptive immune responses, or improve the efficacy of anti-tumor immunotherapy, and further promote the clinical application of DCs, these researches must be necessary and further developed. Our previous studies indicated that TLRs activation could induce markedly increased expression of HDAC9 in DCs. Furthermore, HDAC9 deficiency in DCs inhibited significantly the activation of CD8+ T cell, which suggested an important roles of HDAC9 in the antigen-presentation of DCs. And so, for the more best elucidation and identification about the function of HDAC9, we will perform some experiments in vivo and in vitro, and meanwhile, include other technical methods, for example, FACS, Real time PCR, ELISA, IP and Western Blot, ATAC Seq and Chip-Seq. We believe our works will provide new mechanistic interpretations for the regulation function of HDAC9 in the antigen-presentation, or the activation of T cell induced by DCs. In addition, the related researches about the function of DCs with HDAC9 gene modification in the anti-tumor immunotherapy will bring a new potential target.

树突状细胞的功能调节机制研究，一直是免疫学研究中的重要前沿科学问题。深入研究并进一步阐明树突状细胞功能的调节机制是明确其如何调控适应性免疫应答，提高树突状细胞抗肿瘤免疫治疗疗效、促进其临床应用的必由之路。研究发现TLRs活化能诱导树突状细胞中去乙酰化酶HDAC9表达水平明显增高；HDAC9基因缺失的树突状细胞能显著抑制小鼠脾脏来源的CD8+ T细胞活化，提示HDAC9对树突状细胞抗原提呈功能具有重要作用。本课题将通过体内外实验，利用FACS、Real time-PCR、ELISA、Western-Blot、IP、ATAC-Seq、Chip-Seq等方法深入研究HDAC9如何调节树突状细胞抗原提呈功能、活化T细胞，阐述树突状细胞调节适应性免疫反应的分子机制，并探讨HDAC9基因修饰是否能增强树突状细胞抗肿瘤免疫治疗疗效，为提高树突状细胞抗肿瘤免疫治疗疗效、促进其临床应用提供新靶点。

项目背景：树突状细胞的功能调节机制研究，一直是免疫学研究中的重要前沿科学问题。深入研究并进一步阐明树突状细胞功能的调节机制是明确其如何调控适应性免疫应答，提高树突状细胞抗肿瘤免疫治疗疗效、促进其临床应用的必由之路。.主要研究内容：研究发现TLRs活化能诱导树突状细胞中去乙酰化酶HDAC9表达水平明显增高；HDAC9基因缺失的树突状细胞能显著抑制小鼠脾脏来源的CD8+T细胞活化，提示HDAC9对树突状细胞抗原提呈功能具有重要作用。本课题通过体内外实验，利用FACS、Real time-PCR、ELISA、Western-Blot、IP等方法深入研究HDAC9如何调节树突状细胞抗原提呈功能、活化T细胞，阐述树突状细胞调节适应性免疫反应的分子机制，并探讨了HDAC9基因修饰是否能增强树突状细胞抗肿瘤免疫治疗疗效，为提高树突状细胞抗肿瘤免疫治疗疗效、促进其临床应用提供新靶点。.重要结果关键数据及其科学意义：体外LPS刺激诱导免疫反应的实验结果显示，HDAC9缺失影响IL-12,Il-6,TNFα等细胞因子的表达，表明HDAC9在APC细胞分泌细胞因子调节免疫反应的过程中发挥重要作用。随后进行的体内实验也验证了上述结果。在CpG与OVA诱导的小鼠免疫模型中，HDAC9缺失后，脾脏淋巴结处的免疫细胞分型结果显示，HDAC9参与Th1介导的适应性免疫反应。同时，我们建立了HDAC9缺陷小鼠黑色素瘤荷瘤模型，显示HDAC9抑制肿瘤生长，并且HDAC9缺陷小鼠的肿瘤浸润CD8+T细胞显著减少，并且免疫杀伤功能受损。结合前期体外实验结果，我们检测了抗原递呈细胞中信号通路的变化，结果显示HDAC9缺失抑制MAPK与NF-κB通路的活化。上述结果可以证明前期的预测，HDAC9通过影响MAPK信号通路的活化，调节抗原提呈细胞分泌相关细胞因子，影响T细胞活化，参与调节适应性免疫，同时影响机体的抗肿瘤反应。可作为提高树突状细胞抗肿瘤免疫治疗疗效、促进其临床应用的新靶点。