TRPV1和TRPV2介导艾灸热效应的分子学机制

针对大鼠热受体TRPV1和TRPV2的基因，利用shRNA表达载体介导的RNA干扰技术，研究艾灸生物学效应的穴位分子机制。以辐射热诱发大鼠伤害性行为反应和穴位区域TRPV1/2表达变化为指标，比较艾灸组、RNAi艾灸组、RNAi组和正常对照组大鼠行为学和形态学的变化。并且比较痛觉过敏条件下（完全佛氏佐剂和福尔马林炎性痛觉过敏模型）上述指标的变化。用RNAi转染急性分离的DRG神经元并给予艾灸血清孵育处理，应用膜片钳技术观察DRG神经元TRPV1/2通道介导的电流变化，同时在整体动物进行穴位基因沉默后穴位传入放电与脊髓背角放电与热灸效应相关性的分析。通过比较分析，明确艾灸效应的外周穴位机制是否主要通过该两种热感受受体所介导。为艾灸对穴位热源性刺激效应的外周机制提供最有力的实验依据。

围绕传统医学艾灸疗法机制中参与介导穴位功能与分子基础的相关问题。主要针对艾灸温热性刺激穴位所诱发的生物学效应关键分子的功能与类型进行甄别。通过穴位基因沉默技术、脊髓背角神经元放电记录与热灸的关联性分析、穴位免疫荧光双标记以及穴位功能性差异基因分析等手段，本项目解决了或部分解决了①筛选出两个温度感受性TRPV1和TRPV2蛋白的有效沉默序列；②脊髓背角神经元放电与艾灸热刺激的高度关联性；③穴位区域温度感受性TRPVs通道蛋白类型与相应的信号通路。以寻求艾灸疗法生物学热效应的分子基础，促进人们对传统医学艾灸疗法机理的新认识。已发表或录用论文8篇。