新型易感基因PRRC2A通过调控HLA-B表达介导T细胞活化在狼疮性肾炎发病中的作用及机制研究

Lupus nephritis (LN) is one of the major complications of systemic lupus erythematosus. T cell activation plays a pivotal role in the pathogenesis of LN, but the underlying regulatory mechanism remains largely unclear. We previously found that PRRC2A was a novel susceptible gene for LN by targeted deep sequencing, and confirmed that PRRC2A was down-regulated in podocytes of kidney tissues from both LN patients and animal models. Further results from analysis by bioinformatics and molecular biology showed that PRRC2A could negatively regulate the expression of MHC I molecule HLA-B. Based on the role of HLA-B in T cell activation, we speculate that PRRC2A may participate in the pathogenesis of LN by promoting T cell activation via regulation on HLA-B expression. Thus, this study plans to verify the expression and localization of PRRC2A in renal tissues from a larger sample size of LN patients and animal models, and then investigate the role of PRRC2A in T cell activation and the pathogenesis of LN by gene manipulation technology in LN animal models and podocyte-T cell co-culture models. Lastly, the downstream regulatory mechanism will also be explored in vitro. This study will help to elucidate the function of PRRC2A in the pathogenesis of LN and provide foundation for developing novel therapeutic strategy for the prevention and treatment of LN.

狼疮性肾炎（LN）是系统性红斑狼疮主要并发症之一，T细胞活化在LN发病中起重要作用，但调控机制尚不清楚。我们前期通过靶向深度测序发现富含脯氨酸卷曲蛋白2A（PRRC2A）是LN的新型易感基因，并证实PRRC2A在LN患者及小鼠模型肾组织足细胞中表达下调，随后通过生物信息学及分子生物技术发现PRRC2A可负向调控MHC I类分子HLA-B表达。基于HLA-B在T细胞活化中的作用，我们推测PRRC2A可能通过调控HLA-B表达促进T细胞异常活化，进而参与LN发病。为此，本研究拟收集更大样本量LN患者和动物模型标本进一步验证PRRC2A的表达定位及变化，随后通过基因调控手段在LN动物模型及足细胞-T细胞共培养模型探讨PRRC2A在T细胞活化及LN发病中的作用以及下游调控机制。本研究将有助于阐明新型易感基因PRRC2A在LN发病中的功能作用，为阐明LN发病机制及开发新型防治靶点提供科学依据。

狼疮性肾炎（lupus nephritis，LN）是系统性红斑狼疮最常见的并发症，占中国肾活检的10.88%。尽管激素和新型免疫抑制剂的临床应用，使LN患者的预后有了明显的改善，但仍有30-50%的病人对治疗不敏感，50%的病人治疗后复发，25%的病人10年后进展为终末期肾脏病，是中国终末期肾脏病的重要病因之一。因此，利用现有的先进科技平台和手段，寻找LN早期预警和诊断的生物学标志物，并深入探讨其致病机制，为开发LN特异性靶点药物，对于提高治疗作用，改善病人预后具有重要的临床意义。本研究通过构建MRL/lpr背景的PRRC2A转基因小鼠，使PRRC2A在小鼠肾组织过表达，我们发现，PRRC2A转基因鼠的肾功能较野生型小鼠更好，肾脏病理改变更轻，提示PRRC2A对狼疮肾炎小鼠肾脏具有保护作用。此外，我们发现，与健康对照相比，狼疮肾炎患者和狼疮小鼠的肾小管上皮细胞中ANKS1A表达显著升高，LPS可刺激HK-2细胞ANKS1A，p-Lck，p-NF-kB p65，TNF-a，IL-6的表达水平升高，转染siRNA-Lck下调Lck的表达后，可进一步抑制LPS刺激HK-2细胞后ANKS1A、p-NF-kB p65、IL-6和TNF-a的表达，而转染siRNA-ANKS1A下调ANKS1A的表达后，可抑制LPS刺激HK-2细胞后p-NF-kB p65、IL-6，TNF-a的表达，p-Lck的表达无明显变化，结果提示我们ANKS1A可能通过LCK-ANKS1A-NF-kB通路，参与狼疮性肾炎的发生，我们下一步将继续在狼疮小鼠模型探讨ANKS1A参与疾病的可能机制及其对肾功能的影响。研究的完成将有助于揭示PRRC2A和ANKS1A在LN发病中的作用和机制，对我们进一步认识LN复杂的病理机制及将来开发LN的靶点治疗药物，提供重要线索和依据。