补体H因子在狼疮性肾炎肾血管病变发病机制中的作用研究

Complement activation plays an important role in the pathogenesis of lupus nephritis, of which the alternative pathway activation is highly correlated with renal disease activity. Complement factor H (CFH) is a key regulator of the alternative pathway. Our preliminary data demonstrated that the serum level of CFH was associated with disease activity and pathological features, especially for certain renal vascular lesions in lupus nephritis. In some lupus nephritis patients, SNPs localized to SCR19-20 of CFH were identified and dysfunctions of the corresponding CFH were further confirmed. In addition, our data indicated that renal vascular lesions were common and important pathological features in lupus nephritis. Therefore, we proposed that, in a portion of lupus nephritis patients, dysfunctions of CFH SCR19-20 might affect the target discrimination of CFH and, in turn, contribute to the development of injury of renal vascular endothelial cells. This study will mainly investigate the functions of CFH SCR19-20, including the binding affinity to endothelial cells, influence to alternative pathway activation, and involvement in the complement-induced endothelial injury. The hypothesis that CFH of lupus nephritis patients could be involved in the development of endothelial injury may contribute to a better understanding of the role of complement system in the pathogenesis of lupus nephritis.

在狼疮性肾炎的发病机制中，补体的活化起重要作用，其旁路途径的激活更能准确的反映狼疮性肾炎的活动度。H因子是旁路途径的主要调节蛋白，其SCR19-20片段是结合细胞的重要位点。我们的前期工作发现狼疮性肾炎患者血清H因子水平与肾病的活动度和病理类型，特别是血管病变相关。部分狼疮性肾炎患者H因子存在SCR19-20基因区的SNP，且伴有功能异常。另一方面，我们发现肾血管病变是狼疮性肾炎常见且重要的病理特点。因此，我们推测，在部分狼疮性肾炎患者中，H因子SCR19-20片段功能的异常可能影响了H因子对于内皮细胞的识别，参与了肾血管内皮细胞的损伤。本课题拟合成狼疮性肾炎患者H因子SCR19-20片段，检测其与内皮细胞的结合能力、对补体系统活化的影响、对补体活化介导的内皮细胞损伤的作用，验证狼疮性肾炎患者H因子参与血管内皮细胞损伤的这一假设，希望能够为补体在狼疮性肾炎致病机制中的地位给予合理的补充。

在狼疮性肾炎的发病机制中，补体的活化起重要作用，其旁路途径的激活更能准确的反映狼疮性肾炎的活动度。H因子（FH）是旁路途径的主要调节蛋白，由20个短的相同的重复片段结构域（SCR）组成，不同的SCR有不同的生物学功能。通过基因-临床病理表型关联性分析，我们发现位于SCR7的FH（Y402H）可能与狼疮性肾炎的病理分型更加相关。结合既往的体外研究发现SCR7是FH与CRP、肝素等结合的重要位点，我们遂调整研究方案为围绕SCR7片段的生物学功能探讨FH在狼疮性肾炎发病中的作用：（1）基于SCR7片段的FH与CRP结合的生物学功能研究：单体CRP（mCRP）（a.a.35-47）肽段是狼疮性肾炎患者中mCRP的主要自身免疫性抗原表位，抗mCRP（a.a.35-47）肽段抗体阳性的狼疮性肾炎患者肾脏损伤重，肾脏预后差，其存在是决定肾脏预后的独立危险因素；mCRP（a.a.35-47）肽段介导了mCRP与FH的结合，其结合增强了FH辅助I因子裂解C3转化酶的作用；而抗mCRP（a.a.35-47）肽段抗体抑制了mCRP与FH的结合，并且减弱了mCFP与FH结合对于FH辅助I因子裂解C3转化酶功能的增强作用。因此我们推测，由mCRP（a.a.35-47）肽段介导的mCRP与FH的结合在狼疮性肾炎的发生发展中起重要作用。（2）包括抗SCR7片段在内的抗FH自身抗体在狼疮性肾炎发病中的作用研究：抗FH自身抗体在狼疮性肾炎患者中可能起保护性作用；抗FH抗体结合FH全段、SCR1-4、SCR7及SCR11-14，但不结合SCR19-20；IgG亚型以IgG1为主，其次为IgG2a和IgG2b，未检测到IgG3；抗FH抗体可以增强CFH与C3b的结合，并增强CFH辅助I因子裂解C3b的功能；存在抗FH抗体的狼疮小鼠蛋白尿和血清中自身抗体水平都显著下降，肾脏病理表现较轻且肾脏局部免疫复合物和补体成分沉积也显著下降。因此我们推测，其保护性作用主要依赖于两个方面，即一方面通过加强H因子抑制补体活化的功能，减轻小鼠循环和肾脏局部的补体异常活化；另一方面通过IgG1这一亚型，通过FcγR IIb抑制性受体调节多种免疫细胞的功能，调节免疫紊乱。