人髓系细胞中特异性表达miRNAs的鉴别、功能及作用机制研究

拟在我们已确定miR-233在髓系血液细胞中特异性表达的基础上，研究miR-223在髓系细胞分化发育中的作用及机制。通过DNA转染筛选pre-miR-223加工缺陷型HL-60细胞株(简称缺陷型)。通过反转录病毒介导的向缺陷型细胞的基因转移，筛选表达成熟miR-223的细胞珠（简称恢复型）。比较缺陷型、恢复型和野生型细胞增殖、凋亡和向单核或粒系细胞分化的情况。用生物信息学方法预测miR-223的靶基因，通过比较上述3种细胞株中候选靶基因的蛋白表达，确定靶基因以揭示miR-223的作用机制。通过反转录病毒介导的基因转移，分析miR-223在成人骨髓造血干细胞中过表达和表达抑制情况下对干细胞链系决定和分化发育的影响。搜寻和确定新的与髓系细胞分化发育相关的miRNAs。这些将对揭示造血调控的分子机制具有重要意义，并可能对某些血液系统疾病（如血液系统肿瘤和再生障碍性贫血）的治疗产生潜在的实际意义。