EGF信号通路相关的长链非编码RNA在颌下腺发育中的调控作用及其机制研究

EGF related signal pathways could targetly regulate submandibular gland development. Our previous researches have found that multiple long noncoding RNAs (lncRNA) might be involved in this pathway during inflammation. So, we consider that there might also be some lncRNAs that acted in the EGF related pathway to regulate submandibular gland development. In this research, we first use RNA sequencing to screen any EGF related lncRNAs in submandibular development; and via in vitro organ culture, we'll up/down-regulate the targeted lncRNA in submandibular gland and assess the alterations of relevant proteins, cytokins and ability of branching morphogenesis, in order to reveal the ability of the targeted lncRNA in submandibular gland development. Finally, we'll detect the down stream proteins of the targeted lncRNA via RNA pull-down to detect the exact mechanisms that the targeted lncRNA invovled in EGF signal pathways to regulate submandibular gland development. Our research might provide information to solve the problems in submandibular gland development and help with tissue engeering submandibular gland transplantation for submandibular dysfuntion patients.

EGF相关信号通路可靶向调节颌下腺发育。我们前期研究发现在炎症过程中，多种长链非编码RNA（long noncoding RNA, lncRNA）可能参与了EGF相关信号通路；因此，我们考虑可能存在部分lncRNA参与配合EGF相关信号通路调控颌下腺的发育。本研究首先采用RNAseq的方法确定在颌下腺发育过程中，参与EGF相关信号通路的lncRNA；并采用颌下腺体外器官培养的方法，通过AAV2装载的质粒和siRNA上调/下调靶lncRNA的表达，检测颌下腺发育相关的蛋白、细胞因子及颌下腺分支化形态发生的能力进而研究靶lncRNA对颌下腺发育的影响；最终通过RNA pull-down技术检测靶lncRNA的下游蛋白从而明确其参与EGF相关信号通路影响颌下腺发育的具体机制。为解开颌下腺发育的关键问题、组织工程颌下腺治疗颌下腺功能缺失提供依据。

EGF相关信号通路可靶向调节颌下腺发育。我们前期研究发现在炎症过程中，多种长链非编码RNA（long noncoding RNA, lncRNA）可能参与了EGF相关信号通路；因此，我们考虑可能存在部分lncRNA参与配合EGF相关信号通路调控颌下腺的发育。为解决该问题，我们申请国家自然科学基金青年基金《EGF信号通路相关的长链非编码RNA在颌下腺发育中的调控作用及其机制研究》。拟通过RNA测序（RNA-seq）的方法，在颌下腺发育过程中筛选EGF相关的lncRNA；了解目标lncRNA对颌下腺发育的影响，并进一步证实其在颌下腺发育中的功能及其与EGF信号通路的关系；确认lncRNA的下游蛋白，进而完善EGF/靶lncRNA通路，为研究颌下腺发育提供依据。通过研究，我们发现了大量调控颌下腺发育的EGF相关lncRNA，其中H19表达变化十分明显且H19参与到促进颌下腺发育过程中；同时，我们也发现，TGF-β1信号通路参与拮抗EGF信号通路调控颌下腺发育。进一步研究显示，TGF-β1信号通路下游Smad3能够结合H19启动子区域负向调节H19的表达。同时，H19主要通过Wnt信号通路调节颌下腺发育。除此以外，我们就研究过程中的一些新发现进行了研究，将EGF信号通路下游Syk及H19应用到了头颈肿瘤的研究中，同时，将TGF-β1信号通路下游Smad7应用到了唾液腺增龄性功能减退的研究中。通过该项目，对未来研究唾液腺再生提供了大量依据，发表文章3篇，其中SCI论文2篇，申请发明专利1项，培养博士研究生2名，硕士研究生1名，参加相关会议4人次并在会议中获奖。