女性生殖道粘膜疫苗递送系统新的体外评价模式和判定指标研究

在女性生殖道内定点投送疫苗、佐剂和微生物杀灭剂，是预防HIV/AIDS性传染的研究焦点，但投送体系本身亦可能对病毒的侵染过程产生直接的影响，其后果尚无体外评价体系。本项目将以树突细胞表达C型凝集素受体Langerin即可捕杀病毒、遏止播散为依据，以DC-SIGN和甘露糖受体保护病毒、促进播散为反证，重点研究原位分离的6种11株女性生殖道共生菌对树突细胞捕获病毒能力的直接影响。将首先以THP-1为前体细胞进行探讨，同时系统评价细胞亚群、吞噬能力、细胞因子类别及T细胞刺激能力等基本功能，最终以CD14+单核细胞进行验证。我们的前期工作已发现卷曲乳杆菌能够诱导CD1a和CD324的表达，间接提示Langerin的存在，特申请直接的确认研究并探讨其余菌苗的作用。本项目的实施，不仅可以确定1株以上安全有益的投送菌苗，也将以此为案例，为研究新型粘膜疫苗、佐剂和微生物杀灭剂的体外模式和评价体系探索新路。

本项目已按计划书完成各项任务并有较大拓展。. 一、完成的内容包括：首先在单核前体细胞THP-1中，筛选、比较和分析了全部6种11株原位分离的女性生殖道乳杆菌天然菌苗，进而在外周血单核细胞中对各项指标进行了验证，总体结果以调控单核前体细胞5种C型凝集素受体表达的效应为核心指标，建立了体外快速直接评价粘膜疫苗投送载体的研究模式和判定方法，确定了以卷曲乳酸杆菌为代表的天然乳杆菌菌苗，普遍具有诱导CD207/Langerin表达、促进捕获杀灭HIV-1的的能力，可视为安全有益的投送菌苗开展进一步研发，为下一步粘膜免疫疫苗、佐剂和抗病毒蛋白菌苗系列的创制和评价提供了扎实研究依据和实验基础。. 二、拓展的内容包括：以国际上临床III期试验失败的微生物杀灭剂为反证，直接、确切地检验了该研究模式和判定指标的应用价值，并将HIV-1主要受体CD4和辅助受体CCR5纳入评价体系，同时在诱导CD207/Langerin的菌体分子鉴定、模拟CD3/CD28共刺激免疫活化信号诱导CD4+T细胞抵抗病毒以及HIV-1辅助调节蛋白Nef对DC功能的影响等几方面，展示了该体系在HIV-1致病机理及机理研究中具有广泛的应用前景。. 三、总体结果与项目实施效果：以全新的评价模式和判定指标，建立了女性生殖道粘膜免疫疫苗递送体系临床前评估体系，确定安全有益的粘膜疫苗备选菌苗，共发表SCI论文2篇，参加了中国艾滋病疫苗研究论坛，获云南省重点项目、博士后基金等资助，培养博士后1名，在读博士2名、硕士毕业1名、中青年学术带头人1名、出国研修1人。