人胃癌中microRNA-192和-215的靶基因及功能研究

MicroRNA是一组由约21-25个核苷组成的、可以负向调节靶基因的非编码小分子RNA。研究提示microRNA在肿瘤的发生、发展中起着重要作用。有研究发现microRNA-192和-215在大肠癌中低表达且具有抑癌microRNA的作用，但有关microRNA -192和-215在胃癌中的表达水平及功能尚无报道。我们发现microRNA-192和-215在胃癌细胞株和组织中高表达且可促进胃细胞生长和迁移，预示microRNA-192和-215在胃癌中具有致癌microRNA的作用。本项目拟使用胃组织样本和胃癌细胞株，结合microRNA及基因表达谱芯片、荧光定量PCR、细胞生物学功能检测及活体实验动物等手段系统深入探讨microRNA-192和-215在胃癌组织及细胞中的表达水平及其异常表达的机制、与胃癌临床病理学指标的关联、在胃癌发生进展中所起的细胞生物学功能及其具体调控的靶基因。

本项目探讨了miRNA-192/215在胃癌发生及转移中的作用机制，结果显示miRNA-192/215在胃癌组织及细胞中表达明显增高,提示miRNA-192/215具有一定的促进胃癌发生和或转移的形成；转染miRNA-192/215 的inhibitor或mimics后，胃癌细胞株BGC823的增殖、侵袭等生物学功能分别被抑制或增强；体内成瘤实验证实，BGC823细胞具有较好的成瘤性，且miRNA-192/215具有一定的抑制肿瘤形成能力；通过生物信息学、基因表达谱芯片及双荧光素酶活性检测预测、筛选并证实Rab11-FIP2及SMG1均为miRNA-192/215的直接结合的靶基因；且体外实验证实Rab11-FIP2及SMG1能有效逆转miRNA-192/215inhibitor对BGC823细胞的增殖、侵袭及迁移的抑制作用；信号通路结果显示，miRNA-192/215通过调控Rab11-FIP2参与wnt通路的活化，诱导EMT的形成，从而促进胃癌的发生及转移。由此，本项目揭示了miRNA-192/215参与肿瘤转移的新机制，即miRNA-192/215通过分别抑制Rab11-FIP2及SMG1的表达，促进胃癌的发生及转移；不仅有助于阐明肿瘤转移分子的新机制，还为临床抗胃癌转移提供新的靶点和治疗策略。