体内定时定向分化的鼠E4BP4 BMSCs-NK细胞抗脑胶质瘤体系的构建

自然杀伤(NK)细胞疗法为胶质瘤的治疗提供了一种有价值的潜在解决方案。目前NK细胞的取材困难和它在颅内对胶质瘤的趋向性不足，成为制约NK细胞治疗胶质瘤的主要因素。本课题应用自主调节的四环素控制系统(Tet-on系统)，通过E4BP4基因的定时表达将BMSCs"肿瘤趋向性"与NK细胞"肿瘤杀伤性"整合在一起，意即当BMSCs达到胶质瘤特定部位后，其NK细胞分化程序再被启动，达到定位定时杀伤胶质瘤的效果，并探讨此体系治疗胶质瘤的有效性和具体方案。第一次在体外构建BMSCs向NK细胞定时定向稳定分化的细胞系，通过纳米磁标记结合磁共振动态追踪其体内分布，定时监测决定启动分化的时机。为胶质瘤的免疫治疗提供新的思路，为临床应用价值提供理论基础。

背景：核糖体蛋白S15a （RPS15a），一个高度保守的胞质蛋白，它可以促进mRNA的核糖体翻译/互动。最近的证据表明，RPS15a是肿瘤生长必需的一种蛋白。方法：1.我们使用Western blot 及Qrt-PCR技术分析RPS15A在正常脑组织与胶质母细胞肿瘤组织中的表达差异；2.对123例胶质瘤手术患者进行随访观察，分析患者RPS15A的表达量与其生存时间的相关性；3.利用慢病毒转染RPS15A-RNAi敲低胶质瘤细胞系U87和U251，通过Western blot 及Qrt-PCR技术验证其有效性。4.使用 MTT法、划痕实验、Transwell细胞迁移实验、流式细胞技术和裸鼠肿瘤实验验证RPS15A其胶质瘤细胞系生长和迁移的影响。结果：我们发现，RPS15a在人脑胶质瘤肿瘤组织中高表达。RPS15A可以抑制胶质母细胞瘤细胞的迁移和增殖；敲低PS15A可以抑制p-Akt的磷酸化活性，从而影响细胞周期蛋白，并在G0/G1期对细胞周期进行阻滞。此外，敲低RPS15A可以抑制裸鼠成瘤。结论：我们的研究结果表明，RPS15A可能在胶质母细胞增值中发挥重要作用，作为一种潜在的治疗目标。