TLR9\MyD88\IRF7信号通路在阿片类毒品促进HIV-1复制中的作用及其机制

阿片类毒品可促进HIV-1复制，但其机制尚未清楚。TLR9介导的通路可参与HIV-1的免疫识别。本课题采用分子流行病学方法结合体外研究，调查吸食/注射阿片类毒品对HIV-1病毒载量的影响，检测广西吸食/注射阿片类毒品的HIV-1感染者的外周血单核细胞TLR9及其下游因子MyD88、IRF7、IFN-α/β、ISG56和MxA的表达，分析其表达水平与HIV-1病毒载量的关系。同时，通过细胞-病毒培养模型，用吗啡和/或CpG-ODN预处理健康人单核-巨噬细胞，然后感染或不感染HIV-1毒株，检测上述TLR9及其下游因子的表达，并分析其对HIV-1 P24抗原和逆转录酶活性的影响，研究TLR9\MyD88\IRF7信号通路在阿片类毒品促进HIV复制中可能的作用机制。预期研究成果为制定针对阿片类毒品成瘾的HIV感染者及艾滋病患者的新的免疫治疗方案提供科学依据。

阿片类毒品可促进 HIV-1 复制，但其机制尚未清楚。TLR9 介导的通路可参与 HIV-1 的免疫识别。本课题采用人群研究和体外研究相结合的方法，探讨了TLR9\MyD88\IRF7信号通路在阿片类毒品促进HIV-1复制中的作用及其机制。体内研究对按照纳入和排除标准筛选后的200名研究对象进行流行病学调查，根据是否感染HIV-1以及是否滥用阿片类毒品将研究对象分为四组，即阿片类毒品滥用的HIV-1感染组（Opiate+HIV+）、阿片类毒品滥用非HIV-1感染组（Opiate+HIV-）、非阿片类毒品滥用的HIV-1感染组（Opiate-HIV+ ）和健康对照组（Control），每组各50名。各组人群采集血样，检测血浆HIV病毒载量和CD4+T淋巴细胞计数，分离外周血单核细胞（PBMCs），检测其TLR9及下游因子MyD88、IRF7、IFN-α/β、ISG56和MxA的表达。结果发现Opiate+HIV+ 组病毒载量高于Opiate-HIV+ 组，CD4+T淋巴细胞计数则与之相反；HIV-1感染或阿片类毒品单独作用，均可以下调TLR9及其下游关键因子IRF7、IFN-α的表达；在HIV-1感染的情况下，阿片类毒品可以下调TLR9及其接头蛋白MyD88、关键调节因子IRF7以及效应因子IFN-α/β和抗病毒蛋白ISG56/MxA的表达。体外研究以细胞-病毒培养模型为基础，用吗啡和/或 CpG-ODN 预处理健康人单核-巨噬细胞，在感染或不感染 HIV-1 的条件下，检测上述 TLR9 及其下游因子的表达，并分析吗啡和/或 CpG-ODN对 HIV-1 感染复制（p24）的影响。结果发现吗啡能够抑制体外培养的巨噬细胞TLR9通路中TLR9、MyD88及IRF7的表达，下调抗病毒因子IFN-α/β、MxA、ISG56的表达，促进了HIV-1在巨噬细胞中的复制；此外，吗啡还可以拮抗TLR9信号通路激活后抗病毒因子IFN-α/β、MxA、ISG56的诱导表达，起到拮抗TLR9信号通路激活后的抗病毒作用。本研究从天然免疫角度出发，以TLR9信号通路为切入点，初步阐明了吗啡通过抑制细胞天然免疫TLR9信号通路，从而促进HIV-1复制这一过程及机制。研究结果将有助于更好地理解阿片类毒品影响HIV-1复制的自然过程，为调整阿片类毒品滥用人群的HIV/AIDS治疗方案提供指导。