高血压病肝阳上亢证证候本质及藤菔降压片干预的网络生物学研究

The present study is under the guidance of the concept of holism and idea of treatment based on syndrome differentiation. In addition, the study is about hypertensive patients with liver-yang hyperactivity syndrome, comparing to hypertensive patients with yin-yang deficiency syndrome and healthy volunteers, and is observed the curative changes by Tengfujiangya tablet, based on the syndrome characterization, syndrome essense and essential hypertension diagnostic principles.The blood will be collected for protein components and metabolic components isolation and analysis, further data integration, and biological analysis network of TCM syndromes. The network function module will be searched by simulated annealing algorithm and netwok centralization algorithm wll be used for searching the key nodes, further, the three conditons of network, string, point will be integrated to analyze the metabolic network features of hypertensive liver-yang hyperactivity syndrome. At the same time, the network targets of Tengfujiangya tablet will be found to explore the mechanism and theoretical basis of curative effect, and the scientific essense of prescription-syndrome theory and herbal medicine compound is hoped to be furtherly exlained.

本项目以中医学整体观念和辨证论治理论为指导，立足于高血压病肝阳上亢证的证候表征和内涵实质，在严格界定高血压病肝阳上亢证诊断标准的基础上,以高血压病肝阳上亢证患者为研究主体，并与高血压病阴阳两虚证患者和健康志愿者作横向比较，同时与经中药复方藤菔降压片有效干预后的变化作纵向比较，采集血液标本，分别进行蛋白质组分和代谢物组分的分离与分析，进而整合蛋白组学和代谢组学数据，构建中医证侯生物分析网络，以模拟退火算法寻找网络功能模块，以网络中心化方法分析明确网络关键节点，从网、线、点三方面结合分析高血压病肝阳上亢证的代谢网络特征，从而为研究高血压病肝阳上亢证的病理生理基础提供依据。同时找到中药复方藤菔降压片干预该病证的网络靶点，明确中药复方藤菔降压片干预该病证的作用机制，为临床治疗高血压病提供理论依据，合理诠释方证相关理论和复方中药作用机制的科学内涵。

本项目以中医学整体观念和辨证论治理论为指导，立足于高血压病肝阳上亢证的证候表征和内涵实质，以高血压病肝阳上亢证患者为研究主体，并与高血压病阴阳两虚证患者和健康志愿者作横向比较，与经藤菔降压片有效干预后的变化作纵向比较，分别进行蛋白质组分和代谢物组分的分离与分析；同时运用代谢组学与脂质组学方法考察藤菔降压片对自发性高血压大鼠内源性代谢物的影响，进而整合蛋白组学和代谢组学数据，构建中医证侯生物分析网络，探求高血压病肝阳上亢证的代谢网络特征以及藤菔降压片的作用靶点和干预机制。研究结果（一）采用蛋白质组学的方法发现了血清蛋白Hyal1，CTSG，TGF-β1和KNG1影响RAAS、KKS和血管内皮NO的生成参与了高血压病肝阳上亢证的病理进程，为高血压病肝阳上亢证的特征性血清蛋白。进而通过定量蛋白质组学结合生物信息学分析的策略发现了血清蛋白KNG1，KRT1，MPO，RBP4和SAA为藤菔降压片干预高血压病肝阳上亢证的血清靶蛋白，5种蛋白通过调节KKS以及改善血管内皮炎症损伤而发挥治疗高血压病肝阳上亢证的作用。研究结果（二）采用代谢组学的方法鉴定出健康志愿者、高血压病肝阳上亢证和高血压病阴阳两虚证差异代谢生物标记物67个，经代谢通路分析发现潜在差异性代谢通路9条。通过对藤菔降压片干预前后的高血压病肝阳上亢证受试者的血清样本进行代谢组学研究，鉴定出差异代谢生物标记物70个，经代谢通路分析，发现潜在差异性代谢通路9条，经代谢标记物变化趋势分析，发现经藤菔降压片干预后高血压病肝阳上亢证患者花生四烯酸代谢、亚油酸代谢和甘油磷脂代谢显著下调，精氨酸代谢显著上调。研究结果（三）基于蛋白质和代谢物数据集的综合分析，关联蛋白质与代谢标志物构建高血压病肝阳上亢证生物网络，发现其主要与花生四烯酸代谢、氨基酸代谢、亚油酸代谢等关系密切。