多尺度法则指导的钩藤平肝潜阳方证相关的效应物质和作用机制研究

Starting from "Different herbs have similar pharmacodynamics and evaluating syndrome by herb intervention", the key characteristic of animal model with liver-yang hyperactivity syndrome would be extracted and the discrimination system for animal model with liver-yang hyperactivity syndrome would be established following the theory of "Relation between formula and syndrome". Then, abiding by the idea of "one herb has different pharmacodynamics and evaluating herb by syndrome", we apply the established animal model to testify the effects of different herb components and epurate the effective chemomics of Gouteng for calming liver and suppressing liver-yang hyperactivity and discern the core and peripheral components. The mode for quality control and mechanism interpretation of effective chemomics will be built according to the above research and has the feature: Evaluating syndrome by herb intervention-Evaluating herb by syndrome- Phytomics quality control-systems biology target-molecular biology target" for researching "Relation between formula and syndrome". The goal that accurate quality control and the molecular biological mechanisms interpretation of core components as well as the general quality control and the systems biological mechanisms interpretation of peripheral components will be achieved, and a new idea of "Relation between formula and syndrome" would be scientific and feasible. The new method based on the multi-scale principle could ensure the research is guided by the theories of TCM from the beginning and has significant meaning for modernization and internationalization of TCM.

从"异药同效，以药测证"出发，循方证相关理论，提取肝阳上亢证动物模型的特征因子，构建肝阳上亢证的动物模型判别系统。而后采取"同药异效，以证测药"思路，以肝阳上亢证动物模型反证药物不同组分的作用，提炼钩藤平肝潜阳效应物质组，辨识效应物质组中的核心成分和周围成分，建立"多尺度法则"指导下的效应物质组质控模式和作用机理阐明模式，构建涵括"以证测药-以药测证-植物组学质控-系统生物学靶标-分子生物学靶标"五位一体的中药方-证相关研究新模式，实现核心成分的精确控制与作用机理的分子生物学清晰阐明，周围成分的大致控制与作用机理的系统生物学整体说明，从科学性和可行性结合的角度提供了一条方-证相关研究的新路，建立的多尺度法则指导下中药药效的物质基础和作用机制阐明方法，从源头上确保研究的中医药理论指导，对实现传统中医药的现代化和国际化都有极其重要的意义。

本项目以从“异药同效，以药测证”出发，循方证相关理论，提取肝阳上亢证动物模型的特征因子，构建肝阳上亢证的动物模型判别系统。而后采取“同药异效，以证测药”思路，以肝阳上亢证动物模型反证药物不同组分的作用，提炼钩藤平肝潜阳效应物质组，辨识效应物质组中的核心成分和周围成分，建立“多尺度法则”指导下的效应物质组质控模式和作用机理阐明模式，构建涵括“以证测药-以药测证-植物组学质控-系统生物学靶标-分子生物学靶标”五位一体的中药方-证相关研究新模式。研究结果（一）初步构建了宏观与微观相结合的高血压病肝阳上亢证大鼠模型判别系统，确定出高血压病肝阳上亢证大鼠模型宏观层面以及微观层面的主要特征。研究结果（二）从钩藤中分离得到24个化合物，其中异钩藤碱为钩藤平肝潜阳效应核心成分，剩余成分为钩藤平肝潜阳效应的周围成分。研究结果（三）类固醇激素靶向代谢组学研究发现，包含雄激素、孕激素及皮质激素在内的12种类固醇激素与高血压肝阳上亢证显著相关。异钩藤碱、钩藤药材及齐墩果酸的干预效果优于钩藤碱，并且通过不同的途径发挥平肝潜阳降压的作用。采用脂质组学方法，找到钩藤单味药及其不同成分潜在标志物及代谢途径，高血压大鼠异常代谢物存在于亚油酸代谢、花生四烯酸代谢、鞘脂代谢、甘油酯代谢，甘油磷脂代谢通路中，不同成分干预后，钩藤提取物和齐墩果酸的调节作用较好，敲除异钩藤碱组的作用效果最差。研究结果（四）异钩藤碱对高血压病肝阳上亢证大鼠的机制可能是通过调节血管内皮舒缩因子水平，抑制RAAS系统和交感神经系统活性以及促进ACE-Ang1-7-mas-AKT信号通路中相关信号分子的表达等途径实现的。钩藤平肝潜阳效应周围成分可能是通过调节大鼠血清脂类代谢和能量代谢通路中13个相关的差异代谢物的异常表达来完成的。研究结果（五）钩藤平肝潜阳效应成分主要通过干预MAPK信号通路、T细胞受体信号通路等8条主要信号通路发挥平肝潜阳的效应。