环孢素A诱导母-胎界面Th2型免疫优势的分子机制

胚胎来源的滋养细胞与母体来源的蜕膜基质细胞和免疫活性细胞是母-胎界面主要功能细胞。我们已研究证实，环孢素A（CsA）可改善滋养细胞功能并诱导母-胎界面Th2型免疫优势，从而改善妊娠预后（国家发明专利ZL02112422.1）。本项目在以往研究基础上，进一步探讨CsA如何整合母-胎界面各功能细胞的相互作用，诱导Th2型免疫优势的分子机制。通过建立细胞共培养体系以及Transwell趋化实验，证实CsA通过协调胚胎滋养细胞与蜕膜基质细胞的相互作用，促进母-胎界面趋化因子CCL2分泌；进而募集高表达CCR2的CD4+T细胞与CD14+单核巨噬细胞到达并驻留于蜕膜局部，并进一步诱导CD4+ Na?ve T细胞向Th2型细胞分化。本研究有助于深入了解妊娠期母胎界面Th2型免疫优势的形成机制以及CsA作用的分子机理，为拓展CsA治疗反复自然流产、子痫前期等母胎免疫调节紊乱疾病提供理论基础及科学依据。

胚胎来源的滋养细胞与母体来源的蜕膜基质细胞和免疫活性细胞是母胎界面主要功能细胞，这些细胞之间的协调对话可能在正常妊娠的建立和维持中发挥重要的作用，本项目通过建立功能细胞直接接触与间接接触共培养体系模拟母胎界面，免疫细胞亚群分化诱导体系以及滋养细胞侵袭模型，解析母-胎界面Th2型免疫优势、调节性T细胞扩增与滋养细胞向蜕膜侵袭过程以及环孢素A的调节作用。结果表明：1).人早孕母胎界面蜕膜基质细胞分泌CCL2，通过与蜕膜免疫细胞表面表达的CCR2受体相互作用，诱导其分泌Th2型细胞因子并促进其向Th2型优势分化。2).人早孕滋养细胞分泌CXCL12，通过CXCL12/CXCR4相互作用，协调母胎界面滋养细胞、蜕膜基质细胞与蜕膜免疫细胞的相互作用，一方面促进滋养细胞向蜕膜的侵袭，同时诱导母胎界面呈现Th2占优势的免疫微环境。3).CsA通过升调节人早孕母胎界面CXCL12分泌，通过加强母胎界面三种细胞之间的对话与交流，维持母-胎界面Th2性优势与正常妊娠的进行。4).CsA通过CXCL12/CXCR4的相互作用，协调母胎界面滋养细胞与蜕膜基质细胞的相互作用，促进滋养细胞向蜕膜的侵袭，有助于早孕期胎盘形成。5).CsA还可以通过活化FAK信号进滋养细胞的侵袭与迁移，参与胎盘形成。6).CsA通过活化滋养细胞MAPK/ERK介导的NFkB信号、抑制Calcineurin/NFAT信号促进滋养细胞的侵袭与迁移，参与胎盘形成。7).CsA通过活化MAPK/NFkB信号促进滋养细胞PCNA表达与迁移。此外我们发现母胎界面滋养细胞还可以分泌TSLP，诱导Treg扩增及其与NK细胞交互对话，参与妊娠的维持；蜕膜基质细胞分泌CCL28，保护炎症刺激诱导的细胞凋亡与流产的发生；滋养细胞与蜕膜基质细胞分泌不同分子量的透明质酸，促进自身的增殖，抑制其凋亡。这些研究表明母胎界面环孢素通过升调节母胎界面CXCL12而不是CCL2，整合滋养细胞、蜕膜基质细胞以及蜕膜免疫细胞之间的关系，协调其交互对话，促进母-胎耐受与胎盘发育，为临床反复自然流产等妊娠疾患的防治提供新策略。