TLRs在人胚胎骨髓来源的间充质干细胞免疫调节Th17细胞中的作用

较多研究提示间充质干细胞(MSCs)介导的免疫抑制可能是减轻移植物抗宿主病和调节自身免疫病的治疗策略。Th17细胞，是独立于Th1和Th2的新辅助T细胞亚群，以分泌IL-17为主，具有高度致炎和诱导自身免疫病作用。项目申请人国际上率先发现胚胎骨髓来源的MSCs（FBM-MSCs）不仅没有抑制，反而促进Th17细胞增殖。鉴于Th17细胞的促炎特性和MSCs在临床广阔的治疗前景，有必要进一步探讨MSCs介导的人Th17细胞的调节机制。Toll-like receptor(TLRs)有模式识别受体的功能，可以识别微生物的保守分子成分，启动机体的重要免疫系统。较多研究表明TLRs具有免疫调节Th17细胞的功能，但其在FBM-MSCs调节人Th17细胞中的作用尚不知晓。因此，非常有必要深入探讨TLRs在其中的作用，以更好的了解MSCs的生物学特性，为潜在的临床治疗策略提供更加全面的实验依据。

项目申请人率先发现胚胎骨髓来源的MSCs（FBM-MSCs）促进Th17细胞增殖。Toll-like receptor(TLRs)有模式识别受体的功能，可以识别微生物的保守分子成分，启动机体的重要免疫系统。较多研究表明TLRs具有免疫调节Th17细胞的功能，但其在FBM-MSCs调节人Th17细胞中的作用尚不知晓。本研究旨在探讨TLRs在人FBM-MSCs免疫调节Th17细胞中的作用，为潜在的细胞治疗策略提供更加全面的实验依据。我们应用贴壁法分离人胚胎骨髓来源MSCs，免疫磁珠法分离正常人CD4+ T细胞。CD4+ T细胞单独培养或与MSCs共培养4d。实时定量聚合酶链反应测定IL-17、TLR、MyD88等相关基因的表达水平；酶联免疫吸附试验检测上清中IL-17蛋白水平，流式细胞仪检测Th17细胞的数量。结果表明IL-6促进人Th17细胞的增殖，而TGF-β则抑制Th17细胞的增殖。CD4+ T细胞及MSCs均表达TLR1和3。相对于CD4+单独培养组，MSCs共培养组(MSCs+CD4) IL-17mRNA和Th17细胞数量明显升高；进一步发现TLR1和TLR3 mRNA表达水平相应升高。同样，通路蛋白MyD88的表达在MSCs共培养组亦相应升高。结果表明TLR可能参与MSCs免疫调节人Th17细胞的作用。