IFNγ介导CD8CD45RC-调节性Ｔ细胞诱导移植肝脏免疫耐受的机理研究

To explore the status of immune tolerance, will benefit to induce the transplant tolerance.Liver has complicated antigen presenting cells,which prone to induce tolerance in liver transplantation in rodent research work.The functional mechanism that hepatic APC affect the local T regulatory subsets remains unclearly,and need further investigation.Previously we have demonstrated that IFNγmediated the regulation mechanism of rat CD8+ regulatory T subsets, with higher expression of fibrinogen-like protein 2（FGL2）, which mediated the tolerance of rat transplanted heart. We also found that CD8+ CD45RC- T cells have shown regulatory function in liver. Hence, we propose our hypothesis that in liver transplantation model, IFNγ induced the expression of FGL2in endothelial cells and dendritic cells(DCs), which induced tolerogenic environment, and maintain the transplanted graft long term survival. Based on previous work,here we try to clarify the regulation mechanism of CD8+ T regulatory cells in the liver. Furthermore, we aim to know how the hepatic DCs and endothelial cells, communicate with the CD8+ regulatory T subsets in liver. Finally,we hope to identify novel mechanism of clinical liver transplant tolerance induction.

探明移植器官免疫耐受状态下的调节机理，会给我们回溯寻求诱导免疫耐受的方案以提示和帮助。肝脏具有免疫特惠性，我们和其它中心在动物模型中均成功诱导自发性移植肝脏免疫耐受，但具体机理尚需研究。我们前期发现IFNγ介导CD8+CD45RC-调节性细胞诱导的大鼠移植心脏的免疫耐受，在移植心脏中纤维介素蛋白-2（FGL2）显著高表达。我们近期发现在肝脏中该CD8+调节性细胞具有免疫抑制功能，我们据此推出假说：肝脏移植中，存在以IFNγ介导CD8+调节性细胞免疫调节机制，CD8调节性细胞通过IFNγ，诱导肝窦内皮细胞和树突状细胞表达FGL2，产生局部免疫耐受机制，诱导移植肝脏长期存活。为验证本假说，本课题拟通过大鼠肝脏移植模型和体外细胞培养等方法，研究CD8+调节性细胞诱导免疫耐受的调节机制，揭示肝窦内皮细胞和肝脏树突状细胞对CD8+调节性细胞相互影响的分子基础，发现肝脏自发性免疫耐受的细胞调控网络。

肝移植是终末期肝病唯一有效的治疗手段，但每年仍有5%-15%移植器官可能因慢性排斥及免疫抑制剂毒副作用导致失功，诱导免疫耐受是最终解决上述问题的关键。目前研究基本是以CD4+调节性T细胞展开，近期发现某些CD8+T细胞也具有强大调节作用。受国家自然科学基金资助，我们课题组得以对IFNγ介导CD8+CD45RC-调节性T细胞诱导移植肝脏免疫耐受的机理进行研究。. 课题组主要通过大鼠自发性免疫耐受肝脏移植模型等方法，研究CD8+调节性细胞诱导免疫耐受的肝脏内调节机制，揭示肝窦内皮细胞和肝脏树突状细胞对CD8+调节性细胞相互影响的分子基础，发现肝脏自发性免疫耐受的细胞调控网络。. 我们课题组在大鼠肝移植模型上成功分离出移植物中效应T细胞，CD8+的调节性T细胞及DC细胞，通过与假手术组，急排组比较，发现在免疫耐受组大鼠外周血中CD8+CD45RC-T细胞显著增加，肝脏局部随着耐受时间的延长其相对含量不断增加，且主要通过提高抑制性的细胞因子IL-10对长期免疫耐受起重要调节作用。通过淋巴细胞共培养，发现CD8+调节性T细胞能够有效抑制效应性T细胞的增殖、分化能力，诱导效应性T细胞凋亡。使用抗IFNγ或FGL2抗体后，能够诱导大鼠急性排斥反应，表明阻滞FGL2或IFNγ信号通路对免疫耐受的影响。. 就目前结果来看，该研究丰富和完善了肝脏区域免疫调节细胞CD8+T调节细胞在肝移植免疫耐受性诱导的网络，为临床免疫耐受的诱导提供了新的策略，具有一定的临床意义。