分离小鼠端粒酶阴性自发肿瘤的肿瘤干细胞及其特性的研究

在肿瘤中，10-15%肿瘤通过不激活端粒酶而延长端粒的途径（alternative lengthening of telomeres，ALT）获得永生，并在肿瘤治疗压力下肿瘤细胞容易选择ALT途径逃离死亡，而此类ALT肿瘤的肿瘤干细胞（cancer stem cells，CSC）研究国内外未见报道。我们前期研究发现端粒酶和早老症基因（Wrn）的双敲除小鼠易患ALT 肿瘤，可能与p53基因突变有关。本项目拟用该双敲除小鼠自交系，或者与p53基因敲除和敲入小鼠杂交，获得自发的ALT肿瘤，结合PCR定量分析和流式分选等细胞分离技术,并移植免疫缺陷小鼠复制肿瘤，获得ALT-CSC系以及研究其干细胞干性基因和组织特异基因的表达。初步研究ALT肿瘤干细胞体内外分裂分化和成瘤与p53基因突变的相关性。本项目的研究结果为弄清端粒酶阴性肿瘤发生、发展、治疗、复发及转移提供依据。