利用CRISPR/Cas9筛选金黄色葡萄球菌中影响生物膜形成的细胞壁表面蛋白

The cell wall proteins of Staphylococcus aureus play important role for infections, such as avoiding host immune response, biofilm formation, and bacterial colonization. Previous research have identified several key proteins that affect biofilm production in S. aureus, such as SasG and SasC. To systematically study the abilities of all the cell wall proteins in S. aureus that affect biofilm formation, we will utilize the CRISPR/Cas9 (developed by us) genome editing and the transcription inhibition systems in S. aureus to screen the abilities of all the 21 cell wall protein that affect biofilm production. We will also crystallize and solve the structures of 1-2 key proteins after screening to study the mechanisms. The research will unveil new drug targets and pave the way for small-molecule inhibitor development.

金黄色葡萄球菌细胞壁表面蛋白在规避宿主免疫反应，生物膜形成，细菌定植等方面起着至关重要的作用。先前研究已经发现几种关键性影响金黄色葡萄球菌生物膜形成的细胞壁表面蛋白，比如SasG和SasC等。为了系统研究金黄色葡萄球菌细胞壁表面蛋白影响生物膜形成的能力，我们将利用我们开发的首个此细菌中的CRISPR/Cas9基因组编辑以及转录抑制技术，完整筛选细胞壁表面所有的21个蛋白并考察它们对生物膜形成的影响。我们还将利用结构生物学等手段，结晶并解析其中1-2个关键性蛋白结构，初步探索其影响生物膜形成机制。这一研究将有可能发现新型药物靶标，为后续药物设计奠定基础。

金黄色葡萄球菌细胞壁表面蛋白在规避宿主免疫反应，生物膜形成，细菌定植等方面起着至关重要的作用。先前研究已经发现几种关键性影响金黄色葡萄球菌生物膜形成的细胞壁表面蛋白。为了系统研究金黄色葡萄球菌细胞壁表面蛋白影响生物膜形成的能力，我们利用我们开发的首个此细菌中的CRISPR/Cas9基因组编辑以及转录抑制技术，筛选了金黄色葡萄球菌的细胞壁表面。我们详细探究了一种细胞壁表面蛋白SdrG形成生物被膜的分子机制。同时，我们开发了另外多种病原细菌，包括绿脓杆菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌中的基因编辑方法，为这些物种中生物被膜研究奠定了遗传工具。