突变型EB病毒核抗原1在上皮细胞中的功能研究

通过检测广东地区鼻咽癌患者癌组织以及EB病毒健康携带者外周血中的EBNA1基因，我们发现鼻咽癌组织中的EBNA1基因均为v-val突变型，而健康人外周血中检测到的EBNA1基因多为原型和其它亚型的混合感染。因此，本项目拟分别扩增出原型和v-val突变型EBNA1基因编码区全长，连接到pcDNA3载体上，分别转染人支气管上皮细胞株和高分化的鼻咽癌细胞株，检测突变型EBNA1基因与原型EBNA1基因相比，对上皮细胞是否具有更高的致癌能力；并将突变型EBNA1基因和鼻咽癌细胞特异性的缺失型LMP1基因共同转染人上皮细胞株，与原型的EBNA1基因和LMP1基因相比较，研究突变的EBNA1和LMP1基因是否有协同转化细胞的作用；并通过质粒维持、质粒复制实验和转录激活功能的检测，研究突变型与原型EBNA1蛋白在上皮细胞中的功能差异，探讨突变型EBNA1基因在EB病毒致癌和鼻咽癌发病过程中的作用。