HBV感染者在干扰素治疗前的干扰素刺激基因（ISGs）的表达水平对干扰素治疗应答的影响及机制研究

The anti-HBV effect of interferon (IFN) is affected by the factors of both host and virus. Our previous research results suggested that there was likely relationship between the poor response to IFN therapy and high expression of the Interferon stimulated genes (ISGs) before IFN therapy, which caused that the interferon signaling pathway could not be activated by exogenous IFN.. This study will compare the expression of IFN-associated genes of complete responder and poor responder to IFN therapy in patients with chronic hepatitis B (CHB), so as to explore whether high-expression ISGs decline the expression of upper-stream genes of interferon signaling pathway and interferon regulatory factor (IRF) through a negative feedback mechanism, and affect the response to IFN treatment for CHB patients. Additionally, the mouse model with HBV replication will be used to observe the influence of ISGs on the expression of upper-stream genes of interferon signaling pathway and IRF, and to compare the inhibitory effect of IFN on HBV replication between mice with increased expression of ISGs and those with inhibited expression of ISGs. The purpose of this study is to analysis the exact effects and mechanism of ISGs on the response to IFN therapy in patients chronically infected with HBV.. The results will be helpful to explain the possible mechanism leading to poor therapeutic response to IFN and provide theoretical basis and technical means for individualized antiviral treatment and curative outcome prediction.

干扰素的抗乙型肝炎病毒（HBV）作用受宿主和病毒两方面因素的影响。我们的前期研究结果提示，干扰素治疗应答不佳可能与治疗前干扰素刺激基因（ISGs）高表达，导致外源性干扰素不能正常引发干扰素通路的信号传导有关。. 本课题拟比较对干扰素治疗应答不佳与完全应答患者干扰素治疗前和治疗后ISGs及干扰素通路上游基因与干扰素调节因子（IRF）的表达，了解治疗前高表达的ISGs是否通过机体的负反馈机制抑制了干扰素通路上游基因与IRF，从而影响干扰素治疗应答。同时，利用HBV体内转染复制小鼠模型，观察ISGs上调或下调后对干扰素通路上游基因和IRF的影响以及干扰素对HBV转录复制的抑制作用的差异，分析ISGs在干扰素治疗应答中的确切作用及机理。. 本研究将有助于阐明慢性乙型肝炎患者对干扰素治疗应答不佳的可能机制之一, 进一步为乙肝的个体化抗病毒治疗提供理论依据及技术手段。

干扰素-α（IFN-α）是治疗慢性乙型肝炎（CHB）的有效药物之一，具有抗病毒和免疫调节的双重作用，但目前IFN-α抗乙肝病毒（HBV）的持续应答率较低，而IFN-α 治疗应答不佳的原因及机制目前尚不十分清楚。本项目探讨了IFN-α治疗应答不佳的原因及可能机制。通过采用基因芯片技术检测对IFN-α治疗应答不同慢乙肝患者的干扰素信号通路相关基因 (IFN 基因、IFN 受体基因、IRF和ISGs)，发现在干扰素治疗前，无应答组患者体内的干扰素刺激基因 (ISGs) 高表达、同时刺激ISGs 表达的上游基因及调节因子 (IFN 基因、IFN 受体基因、IRF) 被抑制；而有应答组患者体内较多的内源性IFN 表达上调、同时ISGs 部分表达。IFN-α 治疗使应答组CHB 患者的ISGs 升高，但是无法使无应答组CHB 患者的ISGs 表达上调。进一步行HBV转染小鼠体内实验发现，采用不同处理后，小鼠体内的ISGs、IFN基因、IFN 受体基因、IRF基因表达有一定差异。在前期研究的基础上，我们发现泛素特异性蛋白酶 18（USP18）是干扰素信号通路的重要负性调控因子，其过表达可以减弱干扰素的抗HBV作用，而下调USP18 表达可以解除其对干扰素信号通路的抑制效应，增强干扰素的抗HBV作用。这种作用可能与 USP18 抑制JAK/STAT 信号通路活化，从而抑制下游抗病毒蛋白 MX1的表达水平有关。研究结果提示，USP18对干扰素信号通路的负性调控对于干扰素抗乙肝病毒的疗效有着非常关键的作用。这将为今后提高干扰素抗病毒的临床疗效提供一定的理论基础。