Ad-HGF通过HGF/c-Met信号通路对氯吡格雷干预心肌梗死后心脏功能的保护作用及机制研究

Clopidogrel is a first-line drug for antiplatelet therapy of coronary artery disease (CAD) and its anti-platelet aggregation function has been fully confirmed. However, its effect on the secretion of platelet-derived cytokine and growth factor, especially hepatocyte growth factor (HGF) has not yet been reported. Our previous clinical follow-up study showed that long-term use of clopidogrel in patients with acute coronary syndrome will affect heart function. Further preliminary experiment in Rat with myocardial infarction (MI) showed the effect of clopidogrel on heart function was significantly correlated with HGF level in peripheral blood. HGF is a kind of multifunctional cytokine. Our previous studies have demonstrated that HGF can promote angiogenesis after myocardial infarction, anti-apoptotic, anti-fibrosis and improved cardiac function. Through literature review and preliminary results, we propose the hypothesis that the activity metabolite of clopidogrel may inhibit platelet secretion of HGF and affect cardiac function and myocardial remodeling after myocardial infarction through a competitive combination with platelet membrane ADP receptor and activation of cAMP/Ca2+ signaling pathway. The Ad-HGF-mediated exogenous HGF supply could improve the above-described adverse effects through HGF/c-Met signaling pathway. To verify the above hypothesis, we plan to perform the study in three aspects, namely in vitro, in vivo studies and clinical follow-up study. Our study will provide new experimental evidence and strategy for antiplatelet therapy in patients with CAD.

氯吡格雷作为冠心病抗血小板治疗的一线用药，其抗血小板聚集的作用已得到充分肯定，然而它对血小板源性的细胞因子和生长因子，尤其是对肝细胞生长因子（HGF）分泌的影响尚未见报道。我们前期临床随访研究发现长期服用氯吡格雷会对急性冠脉综合征病人的心脏功能产生影响，预实验发现氯吡格雷对心梗后心脏功能的影响与外周血中HGF的水平显著相关。HGF是一种多功能的细胞因子，我们前期研究已经证实HGF具有促进心梗后血管新生、抗凋亡及改善心功能等作用。通过文献复习及前期获得的结果，我们提出假说，氯吡格雷的活性代谢产物可能通过激活 cAMP/Ca2+信号通路，抑制血小板分泌HGF而对心梗后的心脏功能和心肌重塑产生影响。而Ad-HGF介导的外源HGF补充可以通过HGF/c-Met信号通路改善上述不利影响。为验证此假说，本项目拟从离体、在体和临床随访三个方面进行研究。本研究将为冠心病抗血小板治疗提供新的实验证据和策略。

氯吡格雷作为冠心病抗血小板治疗的一线用药，其抗血小板聚集的作用已得到充分肯定，然而它对血小板源性的细胞因子和生长因子，尤其是对肝细胞生长因子（HGF）分泌的影响尚未见报道。我们前期临床随访研究发现长期服用氯吡格雷会对急性冠脉综合征病人的心脏功能产生影响，预实验发现氯吡格雷对心梗后心脏功能的影响与外周血中HGF的水平显著相关。HGF是一种多功能的细胞因子，我们前期研究已经证实HGF具有促进心梗后血管新生、抗凋亡及改善心功能等作用。通过文献复习及前期获得的结果，我们提出假说，氯吡格雷的活性代谢产物可能通过激活 cAMP/Ca2+信号通路，抑制血小板分泌HGF而对心梗后的心脏功能和心肌重塑产生影响。而Ad-HGF介导的外源HGF补充可以通过HGF/c-Met信号通路改善上述不利影响。为验证此假说，本项目拟从离体、在体和临床随访三个方面进行研究。本研究将为冠心病抗血小板治疗提供新的实验证据和策略。研究结果发现：1、大鼠心梗后6w氯吡格雷组与生理盐水组相比较，其心功能、血管新生情况无明显差异，但心肌纤维化程度有所减轻；2、大鼠心梗后3d氯吡格雷组与生理盐水组相比较，其心脏组织中HGF表达减少；心梗后6w心脏组织HGF及其受体表达无明显差异；3、大鼠心梗后3d氯吡格雷组与生理盐水组相比较，其外周血HGF水平无明显差异；心梗后6w其外周血HGF水平较生理盐水组降低，但血小板内HGF值无相应升高；4、大鼠取血体外ADP活化，氯吡格雷组与生理盐水组比血小板最大聚集率下降并呈浓度相关性，但血浆HGF值无明显差异；5、在针对P2Y12受体拮抗剂的研究中，我们发现其生物学功能可能与自噬、细胞周期调控存在密切联系。6、我们进一步研究发现P2Y12可能与p27介导的HGF高表达存在因果关系，上调P2Y12即促进血小板聚集可以提升血浆中HGFAC的表达量，与此同时达到生物性血管新生的效果。同时，在阅读文献的基础上我们团队发现自噬作为细胞生物调控的重要途径也受到P2Y12等的间接调控。7、对于临床启示：对于优化冠心病患者尤其是PCI术后患者的双抗用药时间带来新的证据，并非越久双联抗血小板越有利于预后。