猪伪狂犬病病毒基因工程抗体的研究

本课题利用伪狂犬病病毒（PrV）北京分离株免疫Bal/bc小鼠，取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，建立了分泌抗PrV单克隆抗体的杂交瘤细胞株；从具有病毒中和活性的1H7杂交瘤细胞中提取mRNA，反转录为cDNA第一链，以此为模板扩增出了抗体重链可变区VH和经链可变区Vl基因；将VH、VL用编码（Gly4 Ser）3的Linker序列拼接为单链抗体基因，克隆入噬菌粒载体PCANTAB5E中，利用M13KO7辅助噬菌体援救，获得了重组噬菌体抗体ELISA检测得到了4个阳性克隆。重组噬菌体感染E.coliHB2151表达出了单链抗体，表达产物具有与PrV抗原结合活性，有望用于PrV的被动免疫预防与治疗。