HPV16 E6调控长非编码RNA ST8SIA6-AS1促进垂体生长激素腺瘤侵袭的机制研究

Invasiveness of GH-PA is the key factor which restrict the therapeutic effects. Our previous study shows the HPV16 E6 can induce the invasion of GH-PA, but the mechanism is unknown. In our pre-experiments we found lncRNA ST8SIA6-AS1 expressed more inE6 positive GH-PAs by transcriptome-seq and qRT-PCR. And we predict the target of ST8SIA6-AS1 is FUS byco-expression analysis and lncRNA database, meanwhile FUS expressed less in invasive GH-PAs. We speculate that HPV16 E6 can regulate expression of ST8SIA6-AS1 thus induce invasion by inhibiting FUS expression. We will investigate:1.In samples and cell line, detect the expression of E6, ST8SIA6-AS1, FUS to confirm their regulating relationships. 2. Study the mechanism between ST8SIA6-AS1 and E6, FUs by RIP etc. The mechanism of HPV16 E6 regulating ST8SIA6-AS1 induced GH-PA invasion may provide a potential target for its medical treatment.

侵袭性是制约垂体生长激素腺瘤（GH-PA）疗效的关键因素。我们最新的研究业已证实，在GH-PA中，HPV16 E6蛋可促进其侵袭，但机制不明。我们前期利用转录组测序筛选、qRT-PCR验证发现HPV16 E6阳性GH-PA中lncRNA ST8SIA6-AS1表达显著增加；通过共表达分析、数据库预测ST8SIA6-AS1作用靶点：FUS，同时FUS在侵袭性GH-PA中表达更少。我们推测，在GH-PA中HPV16 E6可调控ST8SIA6-AS1，进一步抑制FUS表达促进侵袭。本项目拟：1.在GH-PA标本、细胞系中分别干扰并检测E6、ST8SIA6-AS1、FUS表达，验证三者调控关系。2.利用RIP、CHIRP-seq等方法研究ST8SIA6-AS1与E6、FUS作用的机制。本项目以期阐明HPV16 E6通过ST8SIA6-AS1调控GH-PA侵袭性的作用机制，为其药物治疗提供新的可能。

生长激素腺瘤（GH-PA）是垂体瘤（PA）的一种难治亚型。GH-PA虽然在组织形态上为良性，但49.7%的GH-PA具有向周围海绵窦、蝶窦等结构侵袭的现象，侵袭性GH-PA常与更低的手术全切率、更差的预后、高复发率相关，因此药物治疗在侵袭性GH-PA的治疗中显得越来越重要。研究GH-PA侵袭性产生的机制，一方面对于评估、预测GH-PA的预后具有重要意义，另一方面，对于GH-PA药物治疗提供新的靶点与思路。我们既往研究已证实，在GH-PA中，HPV16 E6蛋可促进其侵袭，但机制不明。我们前期利用转录组测序筛选、qRT-PCR验证发现HPV16 E6阳性GH-PA中lncRNA ST8SIA6-AS1表达显著增加；通过共表达分析、数据库预测ST8SIA6-AS1作用靶点：FUS，同时FUS在侵袭性GH-PA中表达更少。我们推测，在GH-PA中HPV16 E6可调控ST8SIA6-AS1，进一步抑制FUS表达促进侵袭。.主要研究内容：本研究拟从临床标本检测以及细胞系等几个方面，探讨 HPV16 E6 对生长激素腺瘤侵袭性影响的信号通路及分子机制。同时，探索代谢对垂体腺瘤增殖的影响。.重要结果：1.TLR3在不同肿瘤中起的作用不同，除胞内信号作用以外，研究中细胞膜TLR3的表达及作用不应该被忽略。2.RNA-seq及系统生物学分析发现侵袭性与非侵袭性生长激素腺瘤差异表达101mRNA及70 lncRNA。进一步分析，确定11个与生长激素腺瘤侵袭性高度相关的基因。3.外源性谷氨酰胺剥夺时，谷氨酰胺合成酶对垂体肿瘤的增殖起重要作用。在谷氨酰胺合成酶表达的垂体肿瘤细胞中，外源性谷氨酰胺主要作用于垂体肿瘤的核酸代谢。4.SCP2通过Hedgehog信号介导胆固醇膜转运促进垂体的生长。.科学意义：1.垂体腺瘤患者垂体腺瘤细胞中TLR3的表达可能预示疾病的预后等，为垂体腺瘤患者精准治疗、预后判断提供新的证据。2.根据RNA-seq及系统生物学分析结果找寻到生长激素腺瘤差异性表达的mRNA及lncRNA，为进一步寻找生长激素腺瘤侵袭性研究提供新的方向，同时为进一步治疗难治性生长激素腺瘤患者提供新的靶点。3.基于谷氨酰及胆固醇代谢变化对垂体腺瘤增殖的影响，进一步可研究通过改变谷氨酰及胆固醇摄入、代谢等影响垂体腺瘤患者预后。