基于体内代谢过程的栀子大黄汤防治酒精性肝损伤作用研究

To establish a medicinally effective components evaluation system of Chinese herbal formula treating alcoholic liver disease, which is not only based on the process of in vivo pertaining to endogenous and exogenous chemical substances changes but relying on modern analytical methods and techniques, combining with physiological and biochemical indexes of the model animals. By acquisition and "recognization translation" of the in vivo metabolome fingerprint changes, this research will evaluate the biochemical material basis and mechanism of action on alcoholic liver disease treatment by Chinese medicinal formulae from a molecular level. To construct technical platform of target compounds and non-target compounds in vivo of Zhi-Zi-Da-Huang decoction, revealing the in vivo composition fingerprint and its variation regularity; to associate with changes of metabolic fingerprint-the chemical components-the in vivo compositions, clarifying the material basis for the medicinal efficacy and mechanism of action on Zhi-Zi-Da-Huang decoction.

建立一种基于体内过程内源性和外源性化学物质变化的、以现代分析方法和技术为依托，结合模型动物生理生化指标的中药复方治疗酒精性肝损伤的药效物质评价体系。通过获取并"识译"体内代谢物组指纹性变化，从分子水平评价中药方剂治疗酒精性肝损伤的生化物质基础及作用机制。构建栀子大黄汤体内目标化合物及非目标化合物研究的技术平台，揭示体内成分谱及其变化规律；关联代谢物组指纹谱-化学成分谱-体内成分谱的变化，阐明栀子大黄汤的药效物质基础和作用机制。

酒精性肝损伤是世界上严重影响人类健康和社会安定的慢性疾病之一,合理、有效的药物治疗十分重要。栀子大黄汤出自《金匮要略》，由栀子、大黄、枳实、淡豆豉四味药材组成,临床上用于治疗酒精性肝损伤已有约2000年历史。由于该经方是多种药材合煎制得，共存成分多且有未知性，加之方中成分的浓度相差达1-2数量级，使得该经方的治疗用活性成分的阐明成为挑战性难题。本研究首先有机组合现代分析技术，在无法获得所有对照品的情况下，以高效液相色谱偶合飞行时间质谱检测器、三重四级杆质谱检测器、二极管阵列检测器，建立了栀子大黄汤中化学成分识别的信息获取体系，然后采用综合分析策略，对汤中不同结构和浓度水平的85种化学成分进行结构确定。为栀子大黄汤体内过程分析奠定了基础。.为研究栀子大黄汤治疗酒精诱导肝损伤作用机制，课题组以现代分析技术为测定手段，通过基于NMR代谢组学研究方法，建立合适的酒精肝损伤动物模型并评价栀子大黄汤药效；同时深入挖掘NMR代谢组学研究结果，尝试结合复杂网络分析方法，进行相关代谢通路分析，发现了栀子大黄汤在缓解酒精引起的氧化应激方面的重要作用。为了系统揭示栀子大黄汤的保肝药效物质基础，我们采用基于整体性思维的非靶标代谢组学方法开展深入研究。非靶标代谢组学可通过多层次、多靶点研究呈现整体的功能状态，从分析仪器捕获的系统信息来解释复杂性理论，以生物体内小分子内源性代谢物的变化来反映外源性因素导致的机体功能变化，其无歧视的整体性正好能满足探索酒精性肝损伤复杂发病机制、揭示复杂组分药效物质基础及作用机制的要求。研究表明：栀子大黄汤对机体的能量代谢、氨基酸代谢、脂质代谢、肠道菌群代谢及核苷酸代谢等代谢途径都有很好的调控作用；在无法获得所有研究物质标准品的情况下，采用非靶标代谢组学方法对中药复方化学成分体内过程及代谢变化的研究，为栀子大黄汤治疗酒精肝损伤作用机制探讨提供了有效途径，同时也是中药复方研究的一个重要的新思路。