BCL2L10在人类卵母细胞非整倍体发生中的作用机制及其miR-15a的调控

卵子是生命的种子。由于材料的匮乏，现有关于卵子质量的研究基本停留于动物模型上。但卵子质量的下降直接影响下一代的人口素质，尤其非整倍体现象是人类最沉重的遗传负担。在我们的前期芯片的研究中发现miR-15a在卵子成熟中有显著变化。目前已证实其靶基因是BCL-2，其中BCL2L10是在人类卵母细胞和卵巢中特异表达的一类BCL2分子。.本项目拟通过显微注射抗体的方法研究BCL2L10对人类卵子减数分裂激酶、纺锤体和线粒体的功能变化的影响，在此基础上进行miR-15a模拟物和阻遏物显微注射，证实其对BCL2L10的蛋白水平的调控和在非整倍体发生中的可能机制。研究结果将对阐明人类卵子老化的机制有重要的意义，并可能为高龄妇女卵子老化问题提供解决的途径，最终从根源上杜绝非整倍体卵子。

在我们前期研究中已证实miR-15a在人类卵母细胞减数分裂过程中呈现为动态下调的改变。凋亡相关基因BCL2是已被确认的miR-15a的靶基因，但BCL2在人卵母细胞内是较低表达，而BCL2L10的表达比较丰富。因此，我们推测在人类卵母细胞内miR-15a的靶基因可能是BCL2家族的BCL2L10。为了验证这一假说，本项目通过在人类卵母细胞内显微注射miR-15a抑制物和类似物，观察卵母细胞的成熟情况，结果显示miR-15a抑制物注射后卵母细胞的成熟呈剂量依赖性降低，而miR-15a类似物则不影响卵母细胞成熟率。miR-15a抑制物50 μM注射后，卵母细胞BCL2L10的表达水平显著下降。本项目进一步证实miR-15a参与人类卵母细胞减数分裂的调控，以及BCL2L10与miR-15a调控的相关性，为在miRNA水平进行卵母细胞非整倍体发生机制的研究奠定基础。