云南芸豆植物凝集素的抗着床及终止妊娠机制研究

已有的工作和我们的研究证明了芸豆植物凝集素（PHA）可阻止受精并对早期胚胎发育表现出低浓度促进和高浓度抑制的作用。我们的研究还显示采用非手术法经阴道和手术法从（单侧）子宫角给予芸豆PHA可抑制1－11d的妊娠。后来又发现在妊娠晚期（17－18d）从（单侧）子宫角给予PHA也能有效终止妊娠。这在以往无任何报道。 本研究的目的是通过小动物和体外模型深入研究芸豆PHA的抗着床，终止胚胎发育的机制，探讨其作为非甾体、非激素类外用避孕药的有效性及安全性。确定芸豆PHA能否作为阴道使用的特异性避孕药或2.是否可安全、有效地运用于终止早、中和晚期妊娠。由于白芸豆原料来源的广泛及安全性，对芸豆PHA进行有关生殖干预机理的研究具有重要意义。 而且，许多研究还显示了它对艾滋病等病毒和病原体的结合和抑制作用。因此芸豆PHA可能是一种同时具有避孕和预防性传播疾病的外用杀（精子）剂的候选者。

本项目在以往我们发现的芸豆植物凝集素（PHA）对小鼠具有抗着床，抑制不同时期的妊娠基础现象基础上，对相关的机制进行了研究。获得了一些主要的结果：.非手术法于合笼前进行一次性子宫注射芸豆ＰＨＡ具有一定的避孕效果。2 d组小鼠怀孕率降低至26.67%，避孕效果最为明显。且该方法不影响小鼠的正常性周期。该实验结果说明芸豆PHA在子宫内的停留或对子宫的影响可达5-7d。2. 完成了白芸豆PHA对小鼠的长期毒性研究；白芸豆PHA对小鼠的一般生殖毒性的研究；白芸豆PHA对小鼠的致畸敏感期毒性的研究；白芸豆PHA对小鼠的围产期毒性研究。实验结果表明连续3个月对雌鼠经阴道或对雄鼠经直肠给予白芸豆植物凝集素后 ，高剂量（4mg/只）和中剂量（2mg/只）组小鼠的大多数脏器系数没有明显的影响。但肝脏和脾脏系数显著增加（p<0.05）; 低剂量（1mg/只）时没有影响。在小鼠妊娠早、中、晚期，皮下给予不同剂量的白芸豆植物凝集素对小鼠没有生殖毒性。3.通过不同检测方法证明，芸豆PHA在促进乳酸菌和盘基网柄菌生长和增殖的过程中本身并没有降解或作为能源物质消耗掉。这样表明了（1）芸豆PHA主要通过细胞外的信号作用方式发挥调节作用；（2）发挥调节作用后本身并不马上降解或作为能源物质被消耗。4. 在终止妊娠方面，根据我们的研究结果可以得出如下结论：芸豆PHA的抗着床作用可通过（1）改变子宫内膜的性质，又可通过（2）对受精卵的直接作用而产生；在终止妊娠方面，芸豆PHA 通过选择性作用于胎盘的滋胚层细胞，通过剂量-效果依从效应导致滋胚层细胞的凋亡和坏死而使胎盘失去作用，从而导致妊娠终止。在终止妊娠的过程中，在生殖内分泌激素方面，芸豆PHA是通过对孕酮（progesterone，P）和胎盘催乳素（placental prolactin，PRL）产生较大影响而实现的，同时对子宫局部的前列腺素（prostaglandin）也有影响。完成了首例红芸豆PHA终止人60d以内的妊娠，首次证明了芸豆PHA在人体终止妊娠的有效性和安全性。结果表明，芸豆PHA不会影响实验动物及人的下丘脑-垂体轴内分泌激素。 这也有力地证明了芸豆PHA宫腔内使用的局部作用。5. 在不同进化等级物种的实验表明：芸豆PHA的信号调节方式的广泛性和保守性，主要为细胞外调节方式。