以细菌菌影为载体的新型淋病奈瑟菌靶向黏膜疫苗的实验研究

淋病是由淋病奈瑟菌引起的发病率最高的性病之一。由于人类缺乏对淋病奈瑟菌的先天免疫力而普遍易感，患者病愈后可被再次感染，危害十分严重。随着耐药菌株不断出现，抗生素治疗也越来越困难。疫苗是控制淋病首选策略之一。传统疫苗和单一组分的疫苗未取得理想的效果，因此设计和研究新型且有效的疫苗以预防淋病的发生已显得极为必要。当前研究疫苗的关键问题是激发机体产生针对保护性抗原强烈而持久的免疫应答，尤其是黏膜免疫。本课题基于淋病奈瑟菌基因组结构、感染及免疫等特点，在已构建并表达的主要保护性抗原 NspA、PorB、OpaI的基础上，构建黏膜疫苗的嵌合载体分子，并通过电转化法将其转入沙门氏菌制备靶向竞争的重组沙门氏菌菌影，并以转基因小鼠为动物模型研究其经黏膜途径诱导的免疫应答机制。上述研究将进一步为淋病奈瑟菌疫苗候选抗原免疫学特性研究、联合疫苗的应用和新型靶向竞争性黏膜疫苗的研制提供理论依据和基础。

淋病是由淋病奈瑟菌引起的发病率最高的性病之一。目前，抗生素治疗是控制淋病传播的主要方式。然而淋病奈瑟耐药菌株的不断出现，使得抗生素治疗越来越困难，很有可能将来无法控制病原体的传播。疫苗是控制淋病首选策略之一，但目前尚无有效疫苗用于预防淋病。传统疫苗和单一组分的疫苗未取得理想的效果，因此研究疫苗候选抗原的特性、设计和研究新型疫苗以预防淋病的发生已显得极为必要。本课题以携带噬菌体裂解基因的溶菌质粒为基础，通过诱导基因的表达制备了沙门氏菌菌影。首先对沙门氏菌菌影的形成条件、稳定性、安全性及作为疫苗诱导小鼠产生免疫应答的情况进行了评价。结果表明，转化的裂解质粒可稳定诱导沙门氏菌内容物排出形成细菌菌影，且具有良好的稳定性、安全性。以小鼠为动物模型，沙门氏菌菌影可诱导机体产生特异性的免疫应答，且能抵抗致病性沙门氏菌的感染。在此基础上，我们以构建的淋病奈瑟菌基因疫苗为模型开展了沙门氏菌菌影作为疫苗载体的研究。结果表明，与单独的淋病奈瑟菌porB基因疫苗相比，沙门氏菌菌影介导的淋病奈瑟菌porB 基因疫苗可诱导小鼠产生较高水平的抗体。研究发现，沙门氏菌菌影及其介导的淋病奈瑟菌PorB均显示出较强的免疫佐剂效应, 并可提高疫苗的免疫应答水平。另外，研究发现，减毒沙门氏菌运送的淋病奈瑟菌基因疫苗通过黏膜途径免疫后可诱导小鼠产生特异性的体液免疫应答和黏膜免疫应答。上述研究进一步为沙门氏菌、淋病奈瑟菌新型载体黏膜疫苗的深入研究提供了理论基础和靶点。