miRNA在人结肠癌细胞羟基喜树碱多药耐药中的作用初探

一直以来,肿瘤多药耐药性是造成临床化疗失败的最主要原因。从新的层面上深入探讨其发生机制可以发现新的逆转多药耐药靶点。我们将利用已经建立起来的人结肠癌羟基喜树碱多药耐药细胞株SW1116/HCPT为研究模型,采用miRNA芯片技术筛选出人结肠癌细胞羟基喜树碱多药耐药相关miRNA,进而通过Northern Blot﹑实时定量PCR和RNA酶保护法初步验证候选miRNA,并利用过表达候选miRNA或反义寡核苷酸技术从生物功能学上进一步验证。最后,运用生物信息学预测miRNA的靶基因,结合基因芯片结果进一步确定多药耐药相关靶基因,并通过荧光酶报告系统验证预测的靶基因。该项目将从一个新的调控水平-miRNA水平来阐明肿瘤多药耐药的发生机制,为逆转肿瘤多药耐药提供了崭新的思路,并为提高临床化疗的敏感性奠定了理论基础。