高效液相偶联酪氨酸酶抑制活性检测与连翘酪氨酸酶抑制有效物质基础研究

酪氨酸酶是黑色素生物合成途径中的主要限速酶，其活性与某些色素障碍性皮肤病、皮肤美白以及水果蔬菜的褐变等有关。研究天然植物源酪氨酸抑制剂，不仅对于色素型皮肤病的治疗，增白美容化妆品配方具有重要意义，而且还可能发现新型的食品添加剂。目前尚缺乏良好的天然酪氨酸酶抑制剂，我们前期工作发现，长白山产连翘具有很好的酪氨酸酶抑制作用。针对天然物中成分多而复杂，用传统的分离方法，不但需要很多时间，而且浪费不必要的溶剂及劳动力。本研究采用高效液相偶联酪氨酸酶抑制活性检测方法，快速分离、鉴定连翘中的酪氨酸酶抑制成分。用细胞生物学、整体动物实验，进一步阐明连翘有效成分抑制酪氨酸酶的作用机制。应用Amber和Sybyl程序和活性测试实验数据，采取动力学方法、构象分析方法及分子叠合方法，建立连翘有效成分的三维药效团模型，不仅能揭示其酪氨酸酶抑制剂的构效关系，同时也可为开发新型酪氨酸酶抑制剂奠定理论与实验基础。

酪氨酸酶是生物体内黑色素合成的关键酶，广泛存在于微生物、动植物及人体中。其活性与动物皮肤中黑色素的形成，果蔬的褐变密切相关。研究天然植物源的酪氨酸酶抑制剂，对预防、治疗因酪氨酸酶异常过量表达导致的人体色素沉着性疾病，开发新的美白化妆产品，防止蔬菜水果褐变具有非常重要的意义。本课题利用利用高效液相偶联酪氨酸酶抑制活性检测方法，快速确定天然植物中的有效成分，通过硅胶柱色谱法、半制备色谱法、凝胶柱色谱法从连翘二氯甲烷部分分离得到具有酪氨酸酶抑制活性化学成分7个，并结合生物化学法、细胞生物学法探讨该7个有效成分的作用机理。为开发新型酪氨酸酶抑制剂或其他天然药物奠定理论和实验基础。