日粮阴阳离子差与钙结合蛋白表达含量关联性及其预防奶牛产乳热的效果研究

产乳热是奶牛围产期频发的一种代谢性疾病，以血钙水平降低为临床特征，可诱发多种疾病，明显降低奶牛生产性能，是奶牛营养学研究的一个重要内容。饲喂干奶期奶牛低阴阳离子差（DCAD）日粮可增强胃肠道吸收对钙的吸收而有效预防产乳热，但目前尚未见其作用机理的报道。钙结合蛋白（CaBP）具有很强的钙亲和力，是参与激活钙的转运系统、发挥其生理功能的重要因子，其表达含量是钙吸收效率的表征。.本项目以羊为奶牛模式动物，检测饲喂不同DCAD水平日粮下组织CaBP表达含量和CaBP mRNA表达丰度，采用正交多态式统计模型建立DCAD、CaBP与血Ca水平之间的相关性，扩增羊CaBP cDNA序列并将其与其它物种相应序列作比较系统发生分析，可为解释饲喂低DCAD日粮预防产乳热奠定基础。同时，将上述研究成果用于奶牛饲养试验，调研我国喀斯特地区大型牧场奶牛日粮DCAD盈亏状况，配制适宜日粮，有利于指导奶牛生产实践。

产乳热是奶牛产犊前后频发的一种营养代谢病，以血钙水平降低为临床特征，是降低奶牛生产性能的重要疾病。低日粮阴阳离子差（dietary cation-anion difference, DCAD, mmol/kg DM）是防治这一疾病的有效手段，但其作用机理尚不明确。. 钙结合蛋白（Ca-binding protein-D9k, CaBP-D9k）具有高度的钙亲和力，其表达含量是钙吸收效率的表征。本项目假设低DCAD日粮可上调动物CaBP-D9k表达，进而易化钙吸收入胞，提高血钙浓度，预防产乳热。. 为证实这一假说，课题组应用Real-Time PCR手段检测了非怀孕和围产期山羊胃肠道组织CaBP-D9k mRNA表达丰度，应用Western Blot检测了非怀孕和围产期山羊胃肠道组织CaBP-D9k蛋白表达水平；在此基础上研究了不同DCAD水平日粮对围产期奶牛的效应，并用于合理配制奶牛日粮，指导奶牛生产。主要结果如下。. （1）降低日粮DCAD水平可降低雌羊尿液pH（P<0.05），增加血钙、磷浓度（P<0.05），提高血浆抗氧化应激能力（P<0.05）。（2）与雌羊类似，围产期山羊尿液、血液pH随DCAD的降低而降低（P<0.05）；此外，低DCAD日粮可显著提高十二指肠、空肠、回肠及结肠CaBP-D9k表达水平（P<0.05）。（3）羊属动物间（山羊/绵羊）CaBP-D9k序列无差异。（4）降低DCAD对围产期奶牛的作用与羊的类似，即尿液pH随DCAD的降低而降低（P<0.05），血浆钙含量随DCAD的降低而增加（P<0.05）；并可改善奶牛产后健康状况。（5）对贵州喀斯特山区大型牧场围产期奶牛DCAD调研表明，围产期奶牛DCAD水平均为正值，在81~158之间变动，应加入阴离子盐，降低DCAD水平。. 上述研究结果，证实了我们提出的假说，即低DCAD日粮可酸化动物胃肠道内环境，上调CaBP-D9k表达，易化钙吸收，在围产期内维持正常血钙水平，预防产乳热。项目研究成果为加深奶牛产乳热的理解提供了新的科学思路和研究基础。