活化巨噬细胞通过分泌miR-155杀伤膀胱癌干细胞的研究

膀胱癌术后膀胱灌注卡介苗较化疗药可以减少复发的机制至今尚未明确，激活的免疫细胞作用于肿瘤干细胞的研究有望将答案揭晓并发现新的治疗靶点。研究发现膀胱癌干细胞表面高表达的CD47可以帮助其逃逸巨噬细胞的杀伤作用而形成新的肿瘤。我们发现通过卡介苗激活的巨噬细胞及其培养液中miR-155的表达量明显增加，生物信息学软件预测CD47即是miR-155的靶基因，且我们已证实miR-155转染膀胱癌干细胞后CD47的表达明显降低。因此，我们推测miR-155的分泌可能在活化巨噬细胞免疫监视中起到重要作用。本研究拟进一步通过共培养、流式分选等技术观察卡介苗激活的巨噬细胞对膀胱癌干细胞的杀伤作用，并结合动物体内实验验证活化巨噬细胞可能是以exosome形式向癌干细胞分泌miR-155，降低了癌干细胞表面CD47的表达来实现巨噬细胞的杀伤作用从而预防肿瘤复发。

膀胱癌中肿瘤干细胞的存在可能是膀胱癌术后容易复发的重要原因之一。通过本项目研究发现，膀胱癌中存在一群具有干细胞特性的细胞存在，它们表达干细胞的蛋白标记，具有更强的细胞增殖能力、化疗耐受性及成瘤能力。这群细胞表面更高表达具有帮助肿瘤细胞发生免疫逃逸的CD47。在对活化巨噬细胞研究中发现活化巨噬细胞分泌液可以明显增加膀胱癌干细胞的凋亡率，从而可能促进其被吞噬。同时检测发现巨噬细胞培养液中的miR-155也明显升高，结合生物信息学软件预测发现CD47是miR-155的靶基因，因而巨噬细胞杀伤癌干细胞可能是通过靶向CD47来实现的。但在对miR-155细胞功能研究发现，miR-155对膀胱癌细胞的作用并不像预期那样，反而在体内外都能促进细胞增殖及迁移。而同样靶向CD47且巨噬细胞培养液中升高的miR-133a则具有抑制细胞增殖的作用,因此我们后续研究将集中在miR-133a，探讨其在预防肿瘤复发中的作用机制。