青天葵注射液调控内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺泡液转运的机制研究

ALI is a kind of common critical disease, high mortality, is a hot and difficult research critical illness. Nervilia fordii has the effect of heat-clearing and detoxifying, can antagonize the inflammation cytokines, protection of alveolar epithelial cells, and the regulation of water channel protein, on the basis of this, this study intends sublingual vein slow injury rat model by injection of LPS induced acute lung, arterial blood gas analysis, detection of rat lung wet / dry weight ratio and the pathological changes of lung tissue in verification endotoxin injury rat model whether to copy the successful induced acute lung; then through detection of TNF-α、TGF-β、IL-6 and other inflammatory cytokine level, Na+-K+-ATPase hydrolysis activity and specificity of binding site number changes, α-ENaC and aquaporin protein expression, to explore the influence of Nervilia fordii injection on the endotoxin induced injury of alveolar fluid transport in rats with acute lung targeting, clarify Nervilia fordii reduce state ALI pulmonary edema, clear Nervilia fordii injection regulation of alveolar fluid transport mechanism.

ALI是一种常见危重症，病死率极高，是危急重病症研究的热点和难点。青天葵清热解毒，可以拮抗炎症细胞因子，保护肺泡上皮细胞，并调节水通道蛋白，在此基础上，本研究拟通过舌底静脉缓慢注射LPS诱导急性肺损伤大鼠模型，通过检测大鼠动脉血气分析、肺湿/干重比值以及肺组织病理改变验证内毒素诱导急性肺损伤大鼠模型是否复制成功；再通过检测TNF-α、TGF-β、IL-6等炎症细胞因子的分泌水平、Na+-K+-ATP酶水解活性和特异性结合位点数量的变化、α-ENaC和水通道蛋白表达情况，探讨青天葵注射液对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺泡液转运的影响，阐明青天葵减轻ALI肺水肿状态的作用靶点，明确青天葵注射液调控肺泡液转运的机制。

急性肺损伤（ALI）的发病机制复杂，发病环节众多，死亡率高，严重威胁着人类的健康，甚至可能危及生命。因此，它已成为临床急危重症领域的一个研究热点。ALI的病理特征为血管通透性肺水肿，与肺泡液转运失衡密切相关，但ALI与肺泡液主动转运之间的机制尚不清晰。本研究通过静脉注射LPS诱导ALI动物模型，围绕肺组织病理改变、炎症失控、肺泡液转运失衡等多个环节进行观察，探讨急性肺水肿与炎症、肺水通道蛋白（AQP）、钠离子通道（ENaC）和Na+-K+-ATP酶的相关性，进一步阐明青天葵促进肺泡液重吸收，减轻ALI肺水肿状态的作用靶点，明确青天葵注射液调控肺泡液转运的机制。.本研究发现，静脉注射LPS成功诱导ALI的动物模型，表现为肺W/D比值上升，血气分析氧分压（PaO2）和氧合指数（OI）值下降，光镜下观察肺组织病理出现肺水肿和肺组织损伤。证实AQP-1、AQP-5、β-ENaC和Na+-K+-ATP酶参与肺泡液的主动转运，促进肺泡液重吸收，而α-ENaC可能不参与。通过青天葵注射液对ALI进行药物干预，发现青天葵注射液调控肺泡液转运的机制与调节AQP和Na+-K+-ATP酶的蛋白表达有关。青天葵注射液可能通过调节AQP-1和Na+-K+-ATP酶的蛋白表达，促进肺泡液转运，减轻肺水肿状态，对AQP-5和α-ENaC无明显调控作用。同时，探索不同剂量LPS在不同时间点诱导对ALI模型的影响，建立不同造模方法的ALI动物模型。证实LPS诱导ALI发生急性炎症瀑布反应，释放大量的炎症因子，并破坏肺水通道蛋白（AQP-1和AQP-5）和钠离子通道（β-ENaC）的主动转运，抑制肺泡液重吸收。.本研究对于揭示ALI的肺水肿发生机制，尤其是肺泡液的主动转运发生机制具有重要意义，同时也为研发具有减轻肺水肿状态，保护ALI的中药新药注射液提供了作用依据，以期未来可进一步应用于临床，减轻疾病的经济和社会负担，意义重大。